Espectrofotometro

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL


ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS





DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA





LABORATORIO DE METODOS DE ANALISIS




PRACTICA:

“VERIFICACION DEL FUNCIONAMIENTO CORRECTO DE UN ESPECTROFOTOMETRO”



SECCION.-III

ALUMNA-
PAEZ MARTINEZ LAURA











INTRODUCCION

Los métodos espectrofotometricos, figuran entre lastécnicas analíticas. La mayoría de los instrumentos espectroscópicos de la región UV- visible, incluye 5 componentes:

• Fuente estable de la energía radiante
• Selector de longitud de onda
• Recipiente para muestra
• Detector de radiación
• Sistema que procesa y lee la señal.

Cuando uno de los componentes falla, se pierde por completo la confiabilidad de las lecturasrealizadas en el aparato. Por ello es necesario tener un control de calidad del aparato el cual nos ayudara a la verificaci0on y la calibración de los aparatos de operaciones de los componentes de los instrumentos, que en este caso es el espectrofotómetro, considerando los valores específicos.

Para el control de calidad de un espectrofotómetro, se debe efectuar el seguimiento de las características oparámetros fotométricos como son:
-sensibilidad de la respuesta.
- exactitud de la escala de la longitud de onda.
- Rendimiento instrumental. Evalúa el funcionamiento de la fuente de radiación, del monocromador y del detector.
- linealidad fotométrica también llamada proporcionalidad, exhibe una relación lineal entre la energía radiante absorbida y la lectura instrumental.
- presencia de luzdispersa, que no es transmitida por el cromóforo y que no se encuentra indicada en el selecto de longitud de onda, ocasiona desviación negativa.
- aumento de ancho de banda. Si es amplio, aumenta la presencia de luz dispersa.
- exactitud fotométrica. Se debe principalmente a la exactitud en la escala de absorbancia en el cromóforo.



OBJETIVOS

❖ Determinara la respuesta instrumentalde un espectrofotómetro
❖ Realizara las siguientes pruebas de control de calidad de un espectrofotómetro:
-sensibilidad de la respuesta.
- exactitud de la escala de la longitud de onda.
- Rendimiento instrumental.
- linealidad fotométrica también llamada proporcionalidad
- presencia de luz dispersa
- aumento de ancho de banda.
- exactitud fotométrica.





DATOS EXPERIMENTALESA) Exactitud de la escala de longitud


Tabla 1.- METODO FILTRADO DE TIERRAS RARAS (DIDIMIO)

|Longitud de |% T |
|onda (nm) | |
|400 |12.2 |
|410 |24.4 |
|420 |39.2 |
|430 |51.6 |
|440 |56.4 |
|450 |51.2 |
|460 |46.0 ||470 |46.4 |
|480 |46.6 |
|490 |44.2 |
|500 |49.2 |
|510 |57.4 |
|520 |53.4 |
|530 |39.6 |
|540 |29.0 |
|550 |30.0 |
|560 |50.0 |
|570 |65.8 |
|580 |56.8 |
|590|32.0 |


b) construir el espectro de transmisión de filtro de didimio colocando en las abscisas la longitud de onda y en las ordenadas el %T
c) Observar el espectro obtenido y s4eñalar aquellas longitudes de onda donde se presentan picos y valles.
d) ¿Coincidieron los máximos y/o mínimos con las longitudes de onda informadas por el fabricante? ¿En que longitudes de ondano fue así?
No, ya que la variación entre las reportadas bibliográficamente y las experimentales son cercanas.
*Ver tabla 6

Tabla 2.- METODO DE LA SOLUCION ESTANDAR (NiSO4 6H2O al 20%)

|Longitud de |% T |
|onda (nm) | |
|380 |16.8 |
|390 |6.4 |
|400 |3.0 |
|410 |2.6 |
|420...