Espectroscopia UV Visible Cuantificación por punto único y por curva de Calibración.

Integrantes del equipo:

No. Lista - Apellido Paterno, Materno, Nombre

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Titulo de la Practica:
Espectroscopia UV Visible
Cuantificación por punto único y por curva de Calibración.

OBJETIVOS
Los alumnos aprenderán a:
1.- Aplicar la técnica de laespectroscopia UV Visible para realizar la cuantificación de compuestos químicos.
2.- Aplicar los métodos de cuantificación por punto único y por curva de calibración para determinar la concentración de un analíto.
3.- Realizar procedimientos de regresión lineal para obtener curvas de calibración.
4.- Realizar los cálculos requeridos para que a partir de la señal de absorbancia registrada a una ciertalongitud de onda pueda deducir tanto el coeficiente de absorptividad de un compuesto como su concentración.


MATERIALES y REACTIVOS POR EQUIPO
Materiales
Vasos de precipitados de 200 mL (4)
Micropipeta de 200 uL
Micropipeta de 1000 uL
Puntas de 200 (amarillas) y 1000 (azules) microlitros
Matraz Volumetrico de 50 mL (5)
Gradilla
Tubos de 13 x 100 mL (20)
Piseta

Reactivos
AguaMilli Q
Cafeína
Acetona

Equipo
Espectrofotómetro
Celdas de Cuarzo


CUESTIONARIO PREVIO
(Son preguntas que harán consciente al alumno de las habilidades y criterios que aprenderá en la práctica)
1.- ¿Cuantos métodos de cuantificación conoce y con cuantos puntos de estándar se trabaja en cada uno de ellos?
2.- ¿Como puede, a través de los métodos que describió en la pregunta 1, calcularla concentración de un analíto? Proporcione ejemplos numéricos.
3.- ¿Para que le sirve la Ley de Lambert y Beer?
4.- ¿ Para que le sirve la Ley de aditividades o Ley de Aditividad de las Absorbancias? Explicar su importancia en términos de analítos interferentes y mezclas de compuestos y contaminación de muestras durante el proceso de análisis.


ANTECEDENTES
(Corresponde a la base teóricamínima que el alumno debe manejar para comprender la práctica)
Los alumnos buscarán e incluirán en su reporte información sobre:
1.- Ley de Lambert y Beer
2.- Ley de Aditividad de las Absorbancias
3.- Métodos de Cuantificación por punto único y por curva de calibración
4.- Regresión Lineal y su aplicación a los métodos Cuantitativos de análisis
5.- Calculo de concentraciones a partir depunto único y curva de calibración

ACCIONES A REALIZAR EL DIA DE LA PRÁCTICA (MUY IMPORTANTE!!)
1.- Breve descripción e introducción a la práctica por el profesor.
2.- Barrido espectral para obtener longitud de onda máxima para lectura.
3.- Preparación de soluciones de curva de calibración. (Ver Procedimiento)
4.- Lectura de estándares y muestras.
5.- Cálculos de regresión lineal y deconcentraciones de muestras.


PROCEDIMIENTO

1.- Pesar 60 miligramos de cafeína dentro de un matraz aforado de 50 mililitros limpio y seco.
2.- Llevar al aforo con agua destilada
3.- Calcular la concentración de cafeína en mol/litro a esta primera concentración le llamaremos Concentración Stock (CSTOCK).
4.- Realizar una dilución de la concentración stock disolviendo 600 microlitros de lasolución stock y llevando a un aforo de 50 mililitros.
5.- Realizar el barrido de Absorbancia contra Longitud de onda y determinar la lambda máxima.
6.- Realizar diluciones adicionales de 200 y 400 microlitros y complementarlas con la lectura de 600 micolitros para realizar la lectura de las absorbancias correspondientes bajo la modalidad espectral de longitud de onda única.
7.- Construir ycalcular mediante regresión lineal la curva de calibración
8.- El profesor le proporcionará una muestra problema cuya concentración deberá calcular con su curva de calibración proporcionándole el valor correcto.



REPORTE
1.- CUESTIONARIO PREVIO
2.- ANTECEDENTES
3.- DESCRIPCION DE LA PRÁCTICA.- Los alumnos deberán describir y reportar paso a paso y con toda claridad y orden las etapas y...