esterilizacion

ANEXO : ESTERILIZACION

El término esterilización puede definirse como el conjunto de operaciones destinadas a eliminar o matar todos los microorganismos presentes en un objeto o sustancia. Como consecuencia de ésta definición un objeto o sustancia estará estéril cuando se demuestre ausencia absoluta de toda forma viable de vida, no existiendo grados de esterilidad.
Para comprender elfundamento de la esterilización por agentes letales es necesario conocer la cinética de muerte de una población microbiana. El único criterio válido de muerte en el caso de los microorganismos es la pérdida irreversible de su capacidad de reproducción.
Cuando una población microbiana se somete a un proceso de esterilización, el número de sobrevivientes (N) disminuye exponencialmente con el tiempo deexposición hasta que no puedan detectarse más organismos viables (Fig. 1). Si se representa gráficamente el logaritmo decimal o natural de N en función del tiempo, se observará un comportamiento lineal, donde la pendiente de la recta obtenida corresponde a la constante de inactivación del proceso (k), que es una medida de la velocidad de muerte de los microorganismos viables (Fig. 2).
La funciónque representa el comportamiento descripto corresponde a una cinética de primer orden, donde la velocidad de destrucción de células es directamente proporcional al número de sobrevivientes. Esto puede expresarse mediante la siguiente ecuación:

dN=-kN (1)
dt
donde
N: es el número de microorganismos viables en el volumen considerado
t: es el tiempo de exposición al agenteletal
k: constante de velocidad de muerte celular
dN/dt: velocidad de muerte celular


Si se considera que k no dependen del t, la integración de esta ecuación (1) permite calcular el tiempo necesario para reducir la población a un determinado valor de N

como:

t= 2,303 log N0 (2)
k N

donde
N0: es el número de microorganismos viables inicialesN: es el número de microorganismos viables luego del tiempo de exposición t

De las gráficas puede verse que no es posible, teóricamente, alcanzar el valor N=0. Cuando el valor es inferior a la unidad, indica la probabilidad de encontrar un microorganismo viable.
De lo expuesto se desprende que cuanto mayor sea N0 y menor la velocidad de muerte, mayor será el tiempo que el material deberá serexpuesto al agente esterilizante, para alcanzar la probabilidad de contaminación que se considere adecuada. Esta tendrá un margen de variación según la futura utilización del material a esterilizar, el método utilizado, condiciones de esterilización y otras variables del sistema a considerar.
Hemos visto hasta aquí que la muerte de los microorganismos responde teóricamente a una cinética deprimer orden. Sin embargo, existen desviaciones al modelo por diferentes causas. A continuación se muestran curvas que presentan desviaciones del modelo teórico. En estos ejemplos el agente esterilizante es calor húmedo a temperatura constante.

En la figura 3 se representa el comportamiento observado en un cultivo de microorganismos esporulados. En los primeros minutos del proceso son más losesporos que se activan que aquellos que mueren por acción del calor húmedo. La figura 4 muestra un caso similar al anterior donde la velocidad de activación de los esporos es aproximadamente igual a la velocidad de muerte.


Figura 3 Figura 4

Finalmente, se observa en la curva de la figura 5, el comportamiento de un cultivo de dos poblaciones microbianas con diferente sensibilidad alagente esterilizante.
Figura 5

-Parámetros de referencia en las curvas de muerte

A partir de las gráficas de las curvas de muerte se pueden definir una serie de parámetros útiles para caracterizar y comparar procesos de esterilización. En la figura 6a y 6b se indican los valores correspondientes al tiempo de reducción decimal D (3) y a Z (4).
D se...