Estructura citoplasmatica

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR Lic. Ciencias Naturales y Educación ambiental Prof. Liliana Gómez Gómez

PRÁCTICA 3 OBSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS Objetivo Observar microorganismos vivos en el microscopio de campo claro. Estudiar su morfología y agrupación, apreciar las diferencias de tamaño entre organismos procarióticos y eucarióticos y Aprender técnicas de coloración e interpretar losresultados obtenidos en la misma, distinguiendo bacterias Gram positivas y Gram negativas, además de algunas de sus estructuras celulares Pre – Laboratorio • ¿Qué es un examen en fresco? • Explique una tinción simple. • Explique diferentes tipos de tinciones diferenciales • Explique diferentes tipos de tinciones estructurales Introducción La morfología de los microorganismos puede examinarse de dosformas: Observando microorganismos vivos sin colorear (en fresco) y observando células muertas teñidas con colorantes. El examen en fresco de los microorganismos permite conocer algunas de sus características (morfología, tamaño, movimiento, etc). Sin embargo, las microorganismos vivos son casi incoloros y no se pueden visualizar fácilmente al microscopio óptico normal cuando se encuentran suspendidosen agua, de ahí que se utilicen colorantes para incrementar su contraste con el entorno que los rodea y de esta forma hacerlos visibles. Los colorantes son compuestos aromáticos solubles en agua (generalmente en forma de sales), que contienen un ión orgánico coloreado y otro ión inorgánico. Pueden dividirse en dos grupos: Ácidos y básicos. El colorante es ácido si la porción coloreada tiene carganegativa, es decir, si tiene un anión coloreado, siendo en este caso repelido por estructuras de la célula que presenten la misma carga, como es el caso de la superficie bacteriana. El colorante se denomina básico si la porción coloreada es el catión, cargado positivamente y con afinidad por estructuras de la célula con carga negativa, como es la superficie celular. Las bacterias toman mejor loscolorantes básicos, como son el cristal violeta, el azul de metil eno y la safranina. La eosina es un colorante de tipo ácido, así como la nigrosina. Materiales Asa de siembra, bajalenguas, escobillones, portaobjetos y cubreobjetos (o portaobjetos excavados), cultivos de microorganismos y microscopio, cinta de enmascarar y marcador.

PRACTICAS DE MICROBIOLOGIA
 

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PROCEDIMIENTO Examen en Fresco Técnica Para la observación de microorganismos sin teñir se pueden utilizar dos tipos de preparaciones: Montaje húmedo y montaje en gota pendiente. En el primer caso, depositar una gota de la muestra tomada con asa de siembra previamente flameada, en un portaobjetos y colocar sobre la misma uncubreobjetos presionando suavemente. En el segundo caso, depositar una gota de la muestra en el centro de un cubreobjetos limpio y colocarlo invertido sobre el pocillo de un portaobjetos excavado, de manera que la gota no se mueva ni tome contacto con los lados o el fondo de la depresión. Utilizar el microscopio con el objetivo de 40 aumentos, disminuyendo la cantidad de luz incidente sobre lamuestra con ayuda del diafragma o bajando el condensador. Un exceso de luz dificultará la observación de los microorganismos, ya que poseen el mismo índice de refracción que el medio circundante (el vidrio del portaobjetos y el líquido en el que se encuentran suspendidos). Si se utiliza el objetivo de inmersión se debe colocar una gota de aceite de inmersión sobre el cubreobjetos. Para reducir laevaporación de la muestra con el calor desprendido por el foco luminoso y que los microorganismos pierdan su movilidad, debe realizarse la operación rápidamente o bien sellar los bordes del cubreobjetos con parafina. Observar la forma y el tamaño de los microorganismos, comparando las levaduras (células eucarióticas) con las bacterias (células procarióticas). Describir su movilidad, diferenciando...