Estructura, propiedades y función de ácidos nucleicos transferencia de material genético I: Conjugación


Práctica 2. Estructura, propiedades y función de ácidos nucleicos transferencia de material genético I: Conjugación

Elaboro: Anacleto Orive Karen, Estrada Garma Elías, Plata Rodríguez Ricardo, Rosas Sánchez Ilse.
Bioquímica Experimental, Facultad de Química, UNAM. Equipo: 2. Grupo: 04 México, DF a 19/02/2015
INTRODUCCIÓN.
La conjugación bacteriana es el proceso detransferencia de material genético entre una célula bacteriana donadora y una receptora mediante el contacto directo o una conexión que las una. Es un mecanismo de transferencia horizontal de genes como la transformación y la transducción, con la diferencia de que estos últimos no involucran contacto intercelular.
Durante la conjugación la célula donadora provee un elemento génico móvil oconjuntivo que generalmente es un plásmido o transposón.  La mayoría de los plásmidos conjuntivos tienen sistemas que aseguran que la célula receptora no tenga ya un elemento similar.
Este proceso es promovido por determinados tipos de plásmidos, que portan un conjunto de genes cuyos productos participan en el proceso, y que requiere contactos directos entre ambas células, con intervención de estructurassuperficiales especializadas y de funciones específicas (pili sexuales en los Gram negativos, y contacto íntimo en los Gram positivos).
Algunos de estos plásmidos se comportan como episomas, es decir, que pueden integrarse en el cromosoma; en este caso, si se produce la conjugación, se puede transferir el propio plásmido más un segmento adyacente del cromosoma, que a su vez podrá recombinarse consecuencias homólogas del cromosoma del receptor, dando lugar a un cromosoma híbrido.
La información génetica transferida a menudo beneficia al receptor. Las ventajas pueden incluir resistencia antibiótica, tolerancia xenobiótica o la capacidad de usar nuevos metabolitos.

OBJETIVOS.
Identificar al DNA como portador de la información genética
Conocer los mecanismos por los que una bacteriapuede adquirir un plásmido.
Reconocer a la conjugación bacteriana como un fenómeno de transferencia horizontal de material genético.
Entender el mecanismo por el cual se realiza la conjugación bacteriana.
HIPÓTESIS.
Si la cepa donadora es resistente a kanamicina y la cepa receptora es resistente a estreptomicina, se espera que la cepa transconjugante sea resistente tanto a kanamicina como aestreptomicina.
RESULTADOS.
Tabla 1. Porcentaje de conjugación grupal y número de colonias que se desarrollaron en los diferentes medios.
 
Receptor
Conjugante
% Conjugación
Equipo
Kan
Strep
Kan
Strep

1
0
26 / 26
42 /47
47 /47
89.36
2
*
*
23 /34
34 /34
67.64
3
*
*
5 / 51
51 /51
9.8
4
0
50 / 50
13 /50
50 /50
26
5
0
43 / 43
9 /43
43 /43
20.93
6
0
50 / 5050 /50
50 /50
100
7
0
50 /50
39 /50
50 /50
78
Promedio


55.96

DISCUSIÓN DE RESULTADOS.
En la tabla 1 se aprecia que el equipo 3 y 4 tienen un porcentaje de conjugación muy bajo esto puede ser debido a varios factores como una mala inoculación en el medio en el cual se trabajó (Luria – agar 2% estreptomicina y Luria – agar 2% sulfato de kanamicina) en el momento en el que se tomóla muestra para parchar, o el tiempo de incubación no fue de 90 minutos y que la mezcla de las dos cepas de E. coli se agitó y no se permitió que se realizara el proceso de conjugación.
El porcentaje de conjugación grupal fue de 55,96% lo que quiere decir que sí se obtuvieron colonias de bacterias transconjugantes resistentes a kanamicina y estreptomicina.
El equipo 6 obtuvo crecimiento decolonias transconjugantes en un 100% lo que nos permite explicar el hecho de que el que no se obtuvo el porcentaje esperado teóricamente fue por un mal manejo de material.

CONCLUSIÓN.
Gracias a que se obtuvieron colonias transconjugantes con genotipo JM1452str/F´kantr3 se logró identificar al DNA como portador de información genética, por el método de conjugación bacteriana comprobando así que...