Estudiante
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.
Fundamento
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.
La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Grampositivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose colonias rosadas o rojas sobre unfondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes.
La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro.
Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (B02-120-05).Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
Pluripeptona | 5.0 | Suspender 60 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta homogeneizar. Calentar a ebullición durante 2 o 3 minutos. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50°C y distribuir unos 20 ml por placa. Secar la superficie del medio unos minutos en la estufa. |
Extracto de carne | 5.0 | | Lactosa | 10.0 | |
Mezcla de sales biliares | 8.5 | |
Citrato de sodio | 8.5 | |
Tiosulfato de sodio | 8.5 | |
Citrato férrico | 1.0 | |
Agar | 13.5 | |
Verde brillante | 0.00033 | |
Rojo neutro | 0.025 | |
pH final: 7.0 ± 0.2 |
Siembra
Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo.
Recomendaciones, se aconseja sembrar en forma conjunta una placa de agarE.M.B. (B02-101-05) o de agar Mac Conkey (B02-114-05).
Incubación
Durante24-48 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.
Resultados
Microorganismos | Colonias |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 | Transparentes, centro negro |
Shigella flexneri | Incoloras |
Shigella sonnei | Incoloras |
Proteus mirabilis ATCC 43071 | Transparentes, centro negro |
Escherichia coli ATCC 25922 | Rosadas arojas |
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 | Rosadas cremosas y mucosas |
Enterococcus faecalis ATCC 29212 | Incoloras, de muy escaso crecimiento |
Características del medio
Medio preparado: rojo naranja.
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Presentación |
x 100g :Código: B02-138-05 | X 500g :Código: B02-138-06 |
* METODO DE CULTIVO PARA OBTENCION DE SALMONELLA
Elmétodo para cultivo de salmonella depende de el origen de la muestra. algunas opciones son:
Las muestras de sangre, médula ósea u orina deben ser cultivadas en agar sangre o chocolate. Además, si los recursos permiten el uso de más de un medio, se debe inocular agar MacConkey (AMC). Las muestras fecales deben ser cultivadas en medios selectivos de agar (por ejemplo, agar bismuto sulfito [BS] o agardesoxicolato citrato [ADC]) debido al alto nivel de contaminantes que contienen estas muestras.
Lo más importante, es el sembrado y la aislación de la bacteria. Puede usarse agar MacConkey, y para estar seguro de que es salmonella, realizar la batería de identificación para enterobacteriaceae (KIA, LIA, SC, CTU, citocromo oxidasa) y revisar en tablas (que están en la literatura) los resultados delas reacciones.
CASO CLINICO Y ETIOLOGÍA
Mujer de 19 años con historia de ITU hace cuatro meses tratada con amoxicilina vía
oral. Acude a urgencias con un cuadro de 5 días de evolución con nauseas sin vómitos,
fiebre, dolor costal en lado izquierdo e incremento de la frecuencia urinaria. En el
momento de la admisión la temperatura fue 38.8ºC y el examen físico mostró
puñopercusión...
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