Estudiante

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
ESCUELA DE TECNOLOGIA MÉDICA
AREA: LABORATORIO CLÍNICO
CUARTO SEMESTRE
BACTERIOLOGIA
2012




PRACTICA : Nº 9
GRUPO :Nº 1
FECHA : Quito, 10 de Enero de 2012
DOCENTE : MSc. Lucrecia Pabón







INFORME Nº 3



TEMA:PRUEBAS BIOQUIMICAS




OBJETIVOSOBJETIVO GENERAL

- Determinar el género y la especie de las bacterias
mediantepruebas bioquímicas, tomando en cuenta los
principios bioquímicos de las pruebas.


OBJETIVOS ESPECIFICOS


- Interpretar los resultados entregados por las
pruebas bioquímicas.
- Saber el uso de las pruebas bioquímicas para la
identificación de microorganismos.
- Identificar erroresde procedimiento en el
Laboratorio, para así mediante el desarrollo
experimental conocer profundamente las pruebas
bioquímicas.






MARCO TEORICO

PRUEBAS BIOQUIMICAS
Las pruebas bioquímicas son un conjunto de pruebas, basadas en el metabolismo del microorganismo, que se realizan con el fin de caracterizar y clasificarlos en género y especie.

FENILALANINA
Es unmedio que contiene fenilalanina, empleado para determinar la presencia de la enzima fenilalanina desaminasa en las bacterias. El ácido fenilpirúvico resultante se detecta mediante la adición de cloruro férrico, manifestando un color verde oscuro intenso.

KLIGER
Es un medio deferencial complejo capaz de poner de manifiesto simultáneamente varias características enzimáticas de la bacteria enaerobiosis y anaerobiosis: fermentación de la glucosa; fermentación de la lactosa; producción de gas en la fermentación; producción de ácido sulfhídrico.

PRODUCCIÓN DE H2S EN EL MEDIO DE SIM
Ciertas bacterias por acción enzimática pueden liberar H2S a partir de compuestos que contienen azufre. Pueden ser compuestos orgánicos: peptonas, cisteína, cistina y de compuestos inorgánicos: tiosulfato. ElH2S es un gas incoloro por lo que es necesario añadir al medio de cultivo indicador (sales ferrosas o iones de metales como plomo, hierro o bismuto), estos en contacto con H2S, forman precipitados negros (sulfitos) en el medio de cultivo.



INDOL
La prueba de indol está basada en la formación de un complejo rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído.Este es el principio activo del reactivo de Kovacs. El medio de cultivo utilizado debe ser rico en triptofano.

MALONATO
Ciertas baterías pueden utilizar malonato sódico como la única fuente de carbono, con la producción de alcalinidad. El indicador azul de bromo timol a un pH 6.7 es de color verde ( medio sin incubar) y a un pH 7.6 cambia a un color azul Prusia.

LISINA
Durante lasprimeras etapas de la incubación el fondo virará el indicador de pH del medio al ácido(amarillo) por la fermentación de glucosa. Luego, si el aminoácido es descarboxilado se formarán aminas que provocan un retorno al color original del medio o hacia un viraje al básico (color violeta).
En la desaminación se produce un ácido carboxílico y NH3 y se visualiza en la superficie la aparición de un colorrojo intenso. La producción de H2S a partir de tiosulfato se visualiza por la precipitación de sulfuro de color negro.

UREASA
Determina la capacidad de un organismo de desdoblar la urea formando dos moléculas de amoniaco por acción del enzima ureasa. Esta actividad enzimática es característica de todas las especies de Proteus y se usa sobre todo para diferenciar este género de otrasenterobacterias que dan negativo o positivo retardado.






ROJO DE METILO
El rojo de metilo es un indicador de pH (rojo=ácido, amarillo=alcalino) que permite indicar la concentración de iones de hidrógeno presentes cuando un microorganismo fermenta la glucosa. Las bacterias rojo de metilo positivo fermentan la glucosa con la producción de ácidos estables: láctico, succínico, acético y fórmico,...