estudiante
Páginas: 2 (426 palabras)
Publicado: 17 de julio de 2014
PRÁCTICA Nº 5
DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE FÓSFORO
Fundamento
La determinación de fósforo en fluidos biológicos, fertilizantes, moléculas orgánicas y productos industrialestiene una gran importancia. En esta práctica se determina fósforo mediante un procedimiento espectrofotométrico que, con ligeras modificaciones, se aplica rutinariamente en los laboratorios clínicos alanálisis de fosfatos en fluidos biológicos.
El método se basa en la reacción del ión fosfato con molibdato(MoO42-) que da lugar a fosfomolibdato([PO412MoO3]3-). Este último por reducción origina uncompuesto cuya estructura exacta se desconoce, denominado “azul de molibdeno”. Como reductores se pueden utilizar muchos compuestos, de los cuales el sulfohidrato de hidrazina, el cloruro estannoso, elácido 1,2,4-aminonaftosulfónico y el ácido ascórbico son los más empleados.
Disoluciones necesarias
Disolución de molibdato: Se prepara disolviendo 12.5 g de molibdato amónico en unos 100 mlde agua destilada, añadiendo 150 ml de H2SO4 5M y diluyendo a 500 ml con agua. La disolución es estable si se mantiene en frasco cerrado.
Disolución reductora: Se prepara disolviendo 1 g de ácidoascórbico en 100 ml de agua.
Disolución de 50 ppm de P: Se prepara disolviendo la cantidad adecuada de sal (NaH2PO4, Na2HPO4, KH2PO4, ó K2HPO4) en agua destilada, añadiendo 2 ml de HCl concentrado ydiluyendo a 1 l con agua destilada.
Material e instrumentación necesarios
Matraces aforados de 50, 100, 500 y 1000 ml.
2 pipetas de 5 ml graduada.
Espectrofotómetro Spectronic 20.Procedimiento operatorio
Establecimiento de la recta de calibrado
En matraces de 50 ml se pipetea la cantidad adecuada de disolución patrón de fosfato. A continuación, con cuidado y sin dejar deagitar se añaden 5 ml de disolución de molibdato y 3 ml de disolución reductora. Se enrasa con agua y se agita la mezcla para homogeneizarla, dejándola reposar a continuación unos 6 minutos –es...
DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE FÓSFORO
Fundamento
La determinación de fósforo en fluidos biológicos, fertilizantes, moléculas orgánicas y productos industrialestiene una gran importancia. En esta práctica se determina fósforo mediante un procedimiento espectrofotométrico que, con ligeras modificaciones, se aplica rutinariamente en los laboratorios clínicos alanálisis de fosfatos en fluidos biológicos.
El método se basa en la reacción del ión fosfato con molibdato(MoO42-) que da lugar a fosfomolibdato([PO412MoO3]3-). Este último por reducción origina uncompuesto cuya estructura exacta se desconoce, denominado “azul de molibdeno”. Como reductores se pueden utilizar muchos compuestos, de los cuales el sulfohidrato de hidrazina, el cloruro estannoso, elácido 1,2,4-aminonaftosulfónico y el ácido ascórbico son los más empleados.
Disoluciones necesarias
Disolución de molibdato: Se prepara disolviendo 12.5 g de molibdato amónico en unos 100 mlde agua destilada, añadiendo 150 ml de H2SO4 5M y diluyendo a 500 ml con agua. La disolución es estable si se mantiene en frasco cerrado.
Disolución reductora: Se prepara disolviendo 1 g de ácidoascórbico en 100 ml de agua.
Disolución de 50 ppm de P: Se prepara disolviendo la cantidad adecuada de sal (NaH2PO4, Na2HPO4, KH2PO4, ó K2HPO4) en agua destilada, añadiendo 2 ml de HCl concentrado ydiluyendo a 1 l con agua destilada.
Material e instrumentación necesarios
Matraces aforados de 50, 100, 500 y 1000 ml.
2 pipetas de 5 ml graduada.
Espectrofotómetro Spectronic 20.Procedimiento operatorio
Establecimiento de la recta de calibrado
En matraces de 50 ml se pipetea la cantidad adecuada de disolución patrón de fosfato. A continuación, con cuidado y sin dejar deagitar se añaden 5 ml de disolución de molibdato y 3 ml de disolución reductora. Se enrasa con agua y se agita la mezcla para homogeneizarla, dejándola reposar a continuación unos 6 minutos –es...
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