Estudiante

INTRODUCCIÓN

En este laboratorio el principal objetivo es observar la reacción de la enzima catalasa y cómo influyen la temperatura y el pH en su actividad enzimática.

Las enzimas son mayoritariamente proteínas biocatalizadoras, es decir, incrementan la velocidad en la cual se llega al estado de equilibrio en las reacciones químicas, permiten la producción de las reacciones metabólicas yson específicas de acuerdo a la reacción que catalizan.

La enzima presenta un sitio activo donde ocurre la catálisis, el cual corresponde al lugar de unión del sustrato que es necesario y especifico para que se produzca la reacción biocatalizadora. Una enzima activa unida a su coenzima (parte no proteica) es denominada holoenzima.

Existen dos factores que alteran la actividad enzimática,estos son la temperatura y el pH.

Las enzimas presentan un pH específico donde su eficiencia es máxima, y si hay un aumento o disminución de este, la actividad enzimática disminuye.
Respecto a la temperatura, la velocidad de las reacciones está modelada por este factor que generalmente se duplica por cada 10ºC de aumento.
A pesar de esto, las enzimas pueden desnaturalizarse, cuando sesobrepasa la temperatura límite (donde trabaja de manera óptima), por el contrario, si se presenta una disminución de temperatura, las reacciones disminuyen o se detienen.

La Catalasa o peroxidasa, es una enzima sintetizada para descomponer el peróxido de hidrogeno (H2O2), el cual es un producto metabólico que se presenta en la mayoría de los seres vivos. Este componente es dañino para lasbiomoléculas de las células por lo que debe ser degradado.

















EXPERIMENTO 1: Funcionamiento de la enzima catalasa.

Materiales:

- 2 tubos de ensayo.

- Hígado de pollo fresco.

- Agua destilada.

- Piceta.

- Peróxido de hidrogeno.

- Micropipeta.

- Bisturí.

- Regla

- 1 gradilla

- Pinzas.

-Plumón permanente.

Métodos:

Para comenzar, con el plumón permanente se enumeraron los dos tubos de ensayo con el fin de agregar a cada uno sustancias distintas; a continuación con el bisturí se cortó un trozo pequeño de hígado de pollo el cual se situó en el tubo N° 1 con la ayuda de la pinza, y al tubo N° 2 se le agregó una cantidad moderada de agua destilada contenida en la piceta(aproximadamente 3 ml). Luego con la micropipeta se le añadió a cada tubo 1 ml de peróxido de hidrogeno.

Al finalizar se observó lo sucedido en los respectivos tubos y se midieron con la regla las burbujas producidas luego de las reacciones, dependiendo de si estas ocurrían o no.



















EXPERIMENTO 2: Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas.Materiales:

- 3 tubos de ensayo.

- Hígado de pollo fresco.

- Baño termorregulado.

- Peróxido de hidrogeno.

- Bisturí.

- Pinzas.

- Gradilla.

- Hielo

- Plumón permanente.

- Micropipeta.

Métodos:

Para comenzar con el segundo experimento, fue necesario calentar el baño termorregulado hasta obtener una temperatura de 80°;luego se rotularon 3 tubos de ensayo con plumón permanente, cada uno de los cuales fueron ocupados con un trozo pequeño de hígado de pollo cortado con el bisturí. Realizado esto, se dejó reposar cada tubo a distintas temperaturas como se muestra a continuación:

Tubo 1: 80°C por 15 minutos en baño termorregulado.

Tubo 2: Temperatura ambiente por 15 minutos en la gradilla.

Tubo 3: Hielopor 15 minutos.

Una vez transcurrido este tiempo con la micropipeta se le agregó 1 ml de peróxido de hidrogeno al tubo 1 el cual se mantuvo en observaciones hasta notar cambios los cuales fueron registrados en la tabla de resultados. Posteriormente se repitió el mismo paso con los dos tubos restantes y se compararon los resultados obtenidos en cada tubo expuesto a diferentes temperaturas....