Estudiante

Departamento de Ciencias Básicas Química Analítica e instrumental I Informe de Laboratorio #11 Métodos de separación por cromatografía
Tabla de Datos

Tabla N° 1 Placa celulosa, muestra de espinaca Nº Compuesto 1 2 3 Distancia al Centro de la mancha (cm) 0,9 3,5 4,5 Distancia al límite del solvente (cm) 10,6 10,6 10,6

Tabla N° 2 Distancia de los aminoácidos Nº Compuesto Acido GlutámicoMetionina Asparagina Triptófano Arginina Distancia al Centro de la mancha (cm) 0,8 3,0 0,6 3,2 0,9 Distancia al límite del solvente(cm) 10,6 10,6 10,6 10,6 10,6

Tabla N° 3 Pigmentos, placa de sílice gel Nº Compuesto 1 2 3 4 5 Distancia al Centro de la mancha (cm) 3,3 5,5 6,2 13,2 16,7 Distancia al límite del solvente(cm) 19 19 19 19 19

Muestra Cálculo Factor de Retardo (Rf)

Muestra decálculo ejemplo de la tabla Nº 1 (compuesto Nº 1 )

Tabla de Rf teóricos PIGMENTOS

Rf teorico Xantofila Clorofila a Clorofila b Violaxantia B caroteno

Pigmento 0,8 0,3 0,2 0,6 1

*Investigados

AMINOACIDOS

Nº Compuesto Acido Glutámico Metionina Asparagina Triptófano Arginina
*

Rf 0.075 0,283 0.057 0,301 0.085

Sacados de la práctica

Tabla de resultado Tabla N°1 Rf de lospigmentos Nº Compuesto 1 2 3 4 5 Tabla N° 2 Rf de los aminoácidos Nº Compuesto 1 2 3 Imágenes de Laboratorio Rf 0,085 0,330 0,425 Nombre del compuesto probable Arginina Triptófano Rf 0,1738 0,2895 0,3263 0,6947 0,8789 Nombre del compuesto probable Clorofila b Clorofila a Violaxantia Xantofila

Imagen 1. Cromatografía de aminoácidos patrón

Imagen 2. Cromatografía de aminoácidos

Imagen 3.Cromatografía de pigmentos

Análisis de resultados El proceso empezó con una extracción etanoica y en el caso de la cromatografía en la capa de sílice de gel etérea, esto se realizo teniendo en cuenta la polaridad de los compuestos a separar, en el caso de la del etanol se extrajeron los compuestos polares como los aminoácidos, mientras que el la extracción etérea se extraen compuestos no polares comoson carotenos y vitaminas liposolubles. El resultado de esta extracción acompañada de una centrifugación, para separar pequeños pedazos de espinaca que pudieran haber en la muestra, y un calentamiento para evaporar el solvente (etanol y Eter de petróleo) con el fin de concentrar más la muestra y que los pigmentos se observaran más rápido y con una coloración más fuerte. Luego se procedió a colocaren una línea de siembra en un punto 4 gotas del pigmento , cada una en su placa correspondiente, y se colocaron en las cámaras, al igual que al principio cuando se escogió los pigmentos acá también se tiene en cuenta la polaridad para decidir cada placa en que disolvente va, en el caso de esta laboratorio se procedió a que la cromatografía en la celulosa se coloco en un solvente de butanol,acetona, ácido acético, agua; y a la de sílice de gel se coloco en tolueno-etanol. Al aplicar las mezclas a analizar a una pequeña distancia del borde de las laminas (celulosa en el caso de los aminoácidos y sílice gel en el caso de los pigmentos) y luego introducirla en la cubera que contiene la fase móvil, esta ascendió a lo largo de la lamina por capilaridad, se desplazaron los componentes de lamezcla lo que nos permitió observar la separación de estos y así visualizar las distancias para luego poder hacer los posteriores cálculos e identificar las sustancias presentes en la muestra al compararlos con las sustancias patrón las cuales también se sometieron al mismo proceso. En el caso de los aminoácidos según la solubilidad que tienen los aminoácidos de la muestra respecto delas dos faseslas cuales se muestran por la una solución de ninhidrina en etanol acidulada y se coloco a la estufa durante 5 minutos, los aminoácidos aparecieron, por que la ninhidrina era la solución reveladora, como manchas púrpura sobre un fondo ligeramente amarillento (ver imagen 2) pero también se observo una mancha en la parte superior de color amarillo oscura este es un compuesto que se conoce como la...