Estudio Cinetico De Enzima Alfa Amilasa

ESTUDIO CINÉTICO DEL ENZIMA ALFA - AMILASA.
EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN, EL pH Y LA TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD DE UNA REACCIÓN ENZIMÁTICA.

SANCHEZ CASTRO, Juan Manuel; BEJARANO GARCIA, Daniel Eduardo
Espacio de Laboratorio de Bioquímica, Facultad de Ciencias Naturales, Universidad ICESI Santiago de Cali, Colombia, Marzo de 2011

PALABRAS CLAVES: cinética enzimática, enzima alfa-amilasa,pH, temperatura, concentración.

El propósito de este informe es describir la cinética enzimática, La cinética enzimática tiene por objeto el estudio de la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas, así como los factores que en ella influyen, por ejemplo la afinidad de las enzimas por los sustratos y los inhibidores, y los mecanismos por los cuales transcurren La cinética enzimáticatiene varias aplicaciones prácticas, que incluyen una mejor comprensión de las fuerzas que regulan las rutas metabólicas y el diseño de tratamientos más adecuados. En esta práctica se comprobó la influencia de la concentración del sustrato (S), del enzima (E), el pH y la temperatura (T) en la cinética del enzima alfa-Amilasa salival en su acción sobre los enlaces alfa 1-4 del almidón. Para nosbasamos en la desaparición del almidón en la unidad de tiempo mediante el seguimiento de la reacción de color que produce el mismo, así como sus productos de hidrólisis con el Iodo en disolución de Ioduro de potasio (Reactivo de Lugol).En cuanto a la concentración utilizada de la alfa-amilasa se obtuvo que es directamente proporcional la concentración de la enzima con el tiempo de la actividad dela enzima; respecto a la temperatura, la enzima tuvo mayor efecto a una temperatura de 100 oC; a un pH de 5 se obtuvo un resultado positivo para todos los intervalos de tiempo y a un pH de 7.2 hubo un cambio a negativo después de 10 minutos. Como la cinética enzimática tiene como función la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios proporcionan información directa acercadel mecanismo de la reacción catalítica y de la especificad del enzima. Para la practica la velocidad se pudo determinar bien midiendo la aparición de los productos o la desaparición de los reactivos.

RESULTADOS Y ANÁLISIS:
Nuestros resultados dieron contrario por la mayor parte. Esto quiere decir que no sucedió la degradación de almidón por la enzima alfa, por lo que al agregar el lugol nosdaba un color azul violeta. En el laboratorio se presentaron errores humanos, como no tomar el tiempo correcto con el cronometro cuando había un viraje en la reacción, y además la solución de saliva y agua, en el caso nuestro, no había una gran concentración, estos factores afectaron de manera directa los resultados. A pesar de esto en este informe pondremos nuestros resultados pero explicaremos loque realmente tuvo que haber ocurrido durante la práctica
Estudio del efecto de la [E] sobre la velocidad de la reacción enzimática (método 1).
Tabla 1. (1) Concentración de la enzima alfa-amilasa (mL) a diferentes intervalos de tiempo en una solución de almidón. (Positivo, degradacion de almidón; negativo, no degradación de almidón).
Tiempo en minutos | Concentración en mL enzima0.1 m L |0.2 mL | 0.3 mL | 0.4 mL |
0 minutos | + | + | + | + |
10 min | + | + | + | - |
20 min | + | + | + | - |
30 min | + | + | - | - |
40 min | + | - | - | - |
50 min | + | - | - | - |

En el método 1 Se logro observar en diferentes intervalos de tiempo cambio de reacciones químicas gracias al uso de lugol para identificar la presencia de almidón en la muestra, el cual se notó en undesvío de color de azul en presencia de almidón y amarillo cuando no había presencia de almidón. Esta reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón con el yodo. La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se unen a las moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. La amilo pectina, el componente...