Estudio De Algunos Factores Que Afectan El Establecimiento De Un Método Espectrofotométrico

Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Métodos Analíticos II
Práctica 3
*Estudio de algunos factores que afectan el establecimiento de un método espectrofotométrico *

Bailón González Cristian Yovani
8BM2
Lunes 3 de Septiembre de 2012

Estudio de algunos factores que afectan el establecimiento de un método espectrofotométrico
Objetivos* Conocer las características que deben de tener los tubos comunes de laboratorio para poder ser utilizados como cubetas para el espectrofotómetro.
* Aprender a manejar algunos de los parámetros que intervienen en el establecimiento de un método espectrofotométrico.
* Conocer y establecer las condiciones óptimas de los parámetros probados para la aplicación del método.
Resultados
IResultados de la selección de tubos
Tabla 1. Selección de tubos comunes para usarlos como celdas.
Tubo No. | % T400(H2O) | Tubo No. | % T400(NiSO4) |
1 | 95.8 | 1 | 18.2 |
2 | 95.6 | 2 | 18.1 |
3 | 97 | 3 | 17 |
4 | 95.7 | 4 | 15.6 |
5 | 93.2 | 5 | 18.2 |
6 | 96.9 | 6 | 15.2 |
7 | 96.5 | 7 | 18.1 |
8 | 95.5 | 8 | 18.5 |
II Curva de calibración
Tabla 2. Curva de calibraciónde Fe3+ por el método del NH4SCN.
Tubo No. | Fe3+(µg/mL) | A480 | A ajustada por regresión lineal |
1 | 0 | 0 | 0 |
2 | 1.396 | 0.010 | 0.019 |
3 | 3.49 | 0.014 | 0.035 |
4 | 6.98 | 0.048 | 0.061 |
5 | 13.96 | 0.132 | 0.113 |
6 | 20.94 | 0.159 | 0.166 |
7 | 48.86 | 0.388 | 0.375 |
8 | 76.78 | 0.656 | 0.585 |
9 | 104.7 | 0.779 | 0.794 |
10 | 132.62 | 0.949 | 1.003 |
11 |160.54 | 1.274 | 1.213 |
12 | 188.46 | 1.383 | 1.422 |
13 | 216.38 | 1.629 | 1.632 |

Figura 1. Curva de calibración de Fe3+ por el método del NH4SCN-.

Tabla 3. Datos para aplicar el método de Ringbom en la determinación de Fe3+por el método del SCN-.
Tubo No. | Fe3+(µg/mL) | Log[ Fe3+] | A480 | %T | Absortancia |
1 | 0 | - | 0 | 0 | 100 |
2 | 1.396 | 0.145 | 0.01 | 97.724 | 2.276 |
3| 3.49 | 0.543 | 0.014 | 96.828 | 3.172 |
4 | 6.98 | 0.844 | 0.048 | 89.536 | 10.464 |
5 | 13.96 | 1.145 | 0.132 | 73.790 | 26.210 |
6 | 20.94 | 1.321 | 0.159 | 69.343 | 30.657 |
7 | 48.86 | 1.689 | 0.388 | 40.926 | 59.074 |
8 | 76.78 | 1.885 | 0.656 | 22.080 | 77.920 |
9 | 104.7 | 2.020 | 0.779 | 16.634 | 83.366 |
10 | 132.62 | 2.123 | 0.949 | 11.246 | 88.754 |
11 | 160.54 |2.206 | 1.274 | 5.321 | 94.679 |
12 | 188.46 | 2.275 | 1.383 | 4.140 | 95.860 |
13 | 216.38 | 2.335 | 1.629 | 2.350 | 97.650 |
Log C
Método de Ringbom para la determinación de Fe3+ por el método del SCN-.
Absortancia


Figura 2. Curva del método de Ringbom para la determinación de Fe3+ por el método del SCN-.

Figura 3. Linealización de la curva del método de Ringbom para ladeterminación de Fe3+ por el método del SCN-, para obtener el error fotométrico.

Cálculo del porcentaje de error fotométrico (%Ep)= 239/m= 230/64.623= 3.56%
III Efecto del tiempo en la estabilidad del color.
Tabla 4. Estabilidad del
color respecto al tiempo.
Tiempo (min) | A480 |
0 | 0.520 |
30 | 0.498 |
60 | 0.486 |
90 | 0.470 |
120 | 0.460 |Figura 4. Gráfica de la estabilidad del color respecto al tiempo.
IV Efecto de la concentración del cromógeno.
Tabla 5. Efecto de la concentración de SCN- en le determinación de Fe3+.
Tubo | SCN- (µg/mL) | Fe3+ (µg/mL) | SCN- /Fe3+ | A480 |
1 | 8700 | 0 | 0.000 | 0 |
2 | 871.2 | 41.88 | 20.802 | 0.107 |
3 | 2323.2 | 41.88 | 55.473 | 0.204 |
4 | 8712 | 41.88 | 208.023| 0.375 |
5 | 29040 | 41.88 | 693.410 | 0.515 |
6 | 58080 | 41.88 | 1386.819 | 0.600 |
7 | 87120 | 41.88 | 2080.229 | 0.685 |
8 | 116160 | 41.88 | 2773.639 | 0.74 |
9 | 145200 | 41.88 | 3467.049 | 0.738 |

Figura 5. Gráfica del Efecto de la concentración de SCN- en la determinación de Fe3+.
V Efecto del pH en el desarrollo de color de la reacción entre el Fe3+ y el SCN-.
Tubo...