ESTUDIO DE ALGUNOS FACTORES QUE AFECTAN EL ESTABLECIMIENTO DE UN MÉTODO ESPECTROFOTOMÉTRICO.
Páginas: 9 (2108 palabras)
Publicado: 7 de diciembre de 2014
Introducción
Experimentalmente para el establecimiento de un método espectrofotométrico, después de optimizar las
condiciones químicas del sistema (pH, temperatura, control de interferentes, concentración adecuada de
reactivos, solvente apropiado, protección a la luz para evitar reacciones fotoquímicas, etc.) que garanticen que
se tiene la especie de interés en condiciones adecuadas para lamedida, se establecen los siguientes
parámetros:
Longitud de onda analítica: Se escoge mediante el registro y/o la observación de la curva espectral o espectro
de la sustancia que indicará si es adecuado tomar la longitud de onda de máxima absorción u otra banda
característica de la sustancia como longitud de onda para realizar las medidas, la longitud de onda escogida se
conoce como longitudde onda analítica.
Intervalo óptimo de concentraciones: Se debe trabajar, en lo posible, con concentraciones que permitan que
se cumpla la ley de Beer, con el fin de obtener una curva de calibración que tenga una relación lineal.
Para obtener el intervalo óptimo de concentraciones primero se construye la curva de Ringbom, que consiste en
construir una gráfica de absorbancia (100- %T) vs. Logconcentración. Los datos se obtienen preparando una
serie de soluciones patrón del analito, que cubran una variación de por lo menos dos órdenes de magnitud de
concentración de este y se miden las transmitancias correspondientes a la longitud de onda analítica escogida.
Para la mayoría de los sistemas la curva de Ringbom corresponde a una curva en forma de S. La parte lineal de
esta gráficapermite obtener el intervalo de concentraciones óptimo o el intervalo que presentara una relación
lineal entre absorbancia y concentración. En esta gráfica, los cruces de la parte recta (la intermedia), con la
parte baja y con la parte alta, pueden servir para determinar un valor para los límites de detección mínimo y
máximo, respectivamente.
Curva de Calibración: Con los datos de la parte rectade la curva de Ringbom se construye la curva de
calibración absorbancia (en las ordenada) vs. concentración (en la abscisa) previo ajuste de los datos por
mínimos cuadrados (que incluyen el punto 0.0, 0.0000) revisando que el coeficiente de correlación sea
estadísticamente significativo. La gráfica de la recta de calibración debe incluir los puntos experimentales.
Límite de detección: Sepreparan, por lo menos, diez soluciones del blanco de procedimiento, se leen las
transmitancias o absorbancia respectivas y se calcula (y= ya + 3SB).
Exactitud del método: La exactitud de un método analítico indica que tan alejado se encuentra el valor medido
del valor verdadero o valor real. Los parámetros antes señalados ,λanalítica, intervalo óptimo de concentraciones,
curva del error,sensibilidad, límite de detección, precisión y exactitud permiten la caracterización de un método
espectrofotométrico, estos parámetros se establecen cuando previamente se hayan optimizado las variables
químicas que puedan afectar la medida de la absorción de luz por parte de la especie de interés.
OBJETIVOS
El alumno:
• Seleccionará tubos comunes de laboratorio para usarlos como cubetas para elespectrofotómetro.
• Manejará algunos de los parámetros que intervienen en el establecimiento de un método
espectrofotométrico
• Establecerá las condiciones óptimas de los parámetros probados para la aplicación del método.
Resultados
Tabla1. Selección de tubos comunes para usarlos como celdas.
1
%T
(H2O)
95
1
%T400
(NiSO4)
16.4
2
3
95.2
2
16.6
95.4
316.6
4
95
4
16.5
5
95.3
5
16.8
6
95.9
6
16.7
7
95.6
7
16.7
8
95.5
8
16.6
9
95.7
9
16.9
10
95.4
10
16.6
11
95.6
11
16.9
12
95.2
12
16.8
13
95.6
13
16.6
14
95.9
14
16.7
15
95.1
15
16.8
Tubo No.
400
Tubo No.
Explique que son las superficies...
Experimentalmente para el establecimiento de un método espectrofotométrico, después de optimizar las
condiciones químicas del sistema (pH, temperatura, control de interferentes, concentración adecuada de
reactivos, solvente apropiado, protección a la luz para evitar reacciones fotoquímicas, etc.) que garanticen que
se tiene la especie de interés en condiciones adecuadas para lamedida, se establecen los siguientes
parámetros:
Longitud de onda analítica: Se escoge mediante el registro y/o la observación de la curva espectral o espectro
de la sustancia que indicará si es adecuado tomar la longitud de onda de máxima absorción u otra banda
característica de la sustancia como longitud de onda para realizar las medidas, la longitud de onda escogida se
conoce como longitudde onda analítica.
Intervalo óptimo de concentraciones: Se debe trabajar, en lo posible, con concentraciones que permitan que
se cumpla la ley de Beer, con el fin de obtener una curva de calibración que tenga una relación lineal.
Para obtener el intervalo óptimo de concentraciones primero se construye la curva de Ringbom, que consiste en
construir una gráfica de absorbancia (100- %T) vs. Logconcentración. Los datos se obtienen preparando una
serie de soluciones patrón del analito, que cubran una variación de por lo menos dos órdenes de magnitud de
concentración de este y se miden las transmitancias correspondientes a la longitud de onda analítica escogida.
Para la mayoría de los sistemas la curva de Ringbom corresponde a una curva en forma de S. La parte lineal de
esta gráficapermite obtener el intervalo de concentraciones óptimo o el intervalo que presentara una relación
lineal entre absorbancia y concentración. En esta gráfica, los cruces de la parte recta (la intermedia), con la
parte baja y con la parte alta, pueden servir para determinar un valor para los límites de detección mínimo y
máximo, respectivamente.
Curva de Calibración: Con los datos de la parte rectade la curva de Ringbom se construye la curva de
calibración absorbancia (en las ordenada) vs. concentración (en la abscisa) previo ajuste de los datos por
mínimos cuadrados (que incluyen el punto 0.0, 0.0000) revisando que el coeficiente de correlación sea
estadísticamente significativo. La gráfica de la recta de calibración debe incluir los puntos experimentales.
Límite de detección: Sepreparan, por lo menos, diez soluciones del blanco de procedimiento, se leen las
transmitancias o absorbancia respectivas y se calcula (y= ya + 3SB).
Exactitud del método: La exactitud de un método analítico indica que tan alejado se encuentra el valor medido
del valor verdadero o valor real. Los parámetros antes señalados ,λanalítica, intervalo óptimo de concentraciones,
curva del error,sensibilidad, límite de detección, precisión y exactitud permiten la caracterización de un método
espectrofotométrico, estos parámetros se establecen cuando previamente se hayan optimizado las variables
químicas que puedan afectar la medida de la absorción de luz por parte de la especie de interés.
OBJETIVOS
El alumno:
• Seleccionará tubos comunes de laboratorio para usarlos como cubetas para elespectrofotómetro.
• Manejará algunos de los parámetros que intervienen en el establecimiento de un método
espectrofotométrico
• Establecerá las condiciones óptimas de los parámetros probados para la aplicación del método.
Resultados
Tabla1. Selección de tubos comunes para usarlos como celdas.
1
%T
(H2O)
95
1
%T400
(NiSO4)
16.4
2
3
95.2
2
16.6
95.4
316.6
4
95
4
16.5
5
95.3
5
16.8
6
95.9
6
16.7
7
95.6
7
16.7
8
95.5
8
16.6
9
95.7
9
16.9
10
95.4
10
16.6
11
95.6
11
16.9
12
95.2
12
16.8
13
95.6
13
16.6
14
95.9
14
16.7
15
95.1
15
16.8
Tubo No.
400
Tubo No.
Explique que son las superficies...
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