estudio de biolo

La recombinación genética es un proceso biológico que se produce normalmente en todos los
organismos, tras el cual se produce un cambio del genoma (patrimonio genético del que está
dotado un organismo) y se verifica normalmente con la rotura y la reunión del ADN [1]. Hoy es
posible crear moléculas recombinantes entre segmentos de ADN que no presentan homología y
que pueden proceder de organismosdiversos. Con el uso coordinado de las enzimas de
restricción y de los vectores moleculares, es posible aislar una secuencia de ADN de cualquier
organismo e inserirla en el ADN de otro. Las formas vivas que han sufrido tal transformación y
que contienen un ADN extraño son llamadas transgénicas. Es quizás necesario abrir un
paréntesis para aclarar el hecho de que la clonación [2] de la oveja Dollyno se ha obtenido con
técnicas de ingeniería genética. Dolly es solamente un gemelo idéntico, como los que se
observan en la naturaleza, aunque estos últimos son "más" idénticos en cuanto que comparten
también el material genético contenido en las mitocondrias [3]. Las técnicas de clonación que
permiten obtener gemelos idénticos consisten en sustituir el núcleo de la célula madre por un
núcleo deun donante del cual se quiere hacer una copia. La célula obtenida de este modo dará
origen a un embrión cuyas mitocondrias contendrán el ADN de la célula madre y no el contenido
en las mitocondrias del organismo del cual se ha querido hacer la copia. En caso de gemelos
idénticos obtenidos naturalmente, los dos individuos comparten todo el patrimonio genético
incluido el mitocondrial. Cerrado esteparéntesis necesario para subrayar la diferencia entre
ingeniería genética y clonación, en la que no se manipula el ADN y no se interviene en el orden
genético de los organismos, pasamos a describir los vectores moleculares necesarios para las
operaciones de ingeniería genética.

VECTORES MOLECULARES: Plásmidos, Bacteriófagos, Cósmidos
Los vectores moleculares son secuencias de ADN de diferentenaturaleza, que pueden
reproducirse autónomamente y en los cuales es posible introducir otras secuencias
nucleotídicas [4]. Deben ser de pequeñas dimensiones, deben poderse purificar fácilmente en
gran cantidad y deben codificar una propiedad que puede ser usada para seleccionar las
bacterias que han recibido el ADN a clonar. Ni la propiedad selectiva ni las funciones de
reproducción deben serinactivadas cuando el ADN extraño es introducido, el vector debe tener
sitios únicos de ataque para diferentes encimas de restricción específicas, debe tener
propiedades que permitan seleccionar moléculas de ADN recombinante y debe estar en grado
de promover la expresión de las moléculas clonadas. Los vectores con estos requisitos han
sido construidos desde los plásmidos y desde los fagos que seencuentran en la naturaleza.
Plásmidos
(Del Giudice 1987; Ayala y Kiger 1984; Maniatis et alii 1982 págs. 3-15)
Los plásmidos son secuencias de ADN extracromosómicas [5] que tienen la capacidad de
reproducirse autónomamente y, algunos, de pasar de una célula a otra y convertirse en parte
integrante del cromosoma que los acoge. Los plásmidos llevan consigo genes en grado de
conferir particularidadesfenotípicas [6] a las bacterias que los contienen, como la resistencia a
los antibióticos. El plásmido pBR 322 es el más ampliamente usado para clonar, es de
pequeñas dimensiones y lleva los genes para la resistencia a los antibióticos ampicilina (amp) y
tetraciclina (tet). Contiene un solo sitio de restricción [7] para el PstI en el interior del gen amp y

sitios únicos de restricción para BamHI ySalI [8] en el interior del gen tet. La introducción de un
gen en los sitios arriba citados determina la pérdida de la resistencia en los enfrentamientos de
dichos antibióticos permitiendo, a través de la placa a reproducir [9], la selección de los clones
que han recibido el nuevo gen.
Bacteriófagos
(Maniatis et alii, 1982, págs. 22-23, pág. 53)
Los bacteriófagos son unos virus que infectan a las...