Estudio de espectofotometria

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA











FACULTAD DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

ANALISIS DE LOS ALIMENTOS
LABORATORIO Nº 8

“Espectrofotometría”

INTEGRANTES : Flores Suarez Yenny
Ramos Calderón Andrea
Peregrino Urbina Wilfredo
Villanueva Dávila Diego


PROFESORA : Patricia Glorio Paulet



LIMA – PERÚ
2011I.- INTRODUCCIÓN

La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energíaradiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo.
La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energíaes absorbida; la energía radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida.
El método usado en la práctica para usar el espectrofotómetro fue el de determinar azúcares reductores por elmétodo del DNS.
El método del DNS se basa en que el ácido 3.5-dinitrosalicílico en medio alcalino reacciona con el grupo reductor, formando un compuesto de color marrón cuya intensidad es proporcional a la cantidad de azúcares presentes.
La práctica tuvo como objetivo conocer algunos métodos de determinación espectrofotometría para alimentos líquidos y sólidos, en este caso específico, paradeterminar el contenido de azúcares reductores por el método del DNS.

II.- REVISIÓN DE LITERATURA

En esta práctica se hace uso del espectrofotómetro, el cual tiene los siguientes componentes:
Fuente de luz
La fuente de luz ilumina la muestra. Las condiciones necesarias de la fuente son estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas enlos espectrofotómetros son lámparas de tungsteno de bajo voltaje, lámpara tungsteno-halógena o lámpara de pulso/arco de xenón.
La lámpara de tungsteno tiene una potencia de salida uniforme y la salida de luz puede controlarse mediante la energía suministrada al foco. Una bombilla pequeña de filamento enrollado es apropiada para concentrar el flujo de luz en un haz intenso. Cuando la lámpara detungsteno-halógena funciona con corriente constante, la fuente tiene un alto grado de estabilidad y larga vida. La lámpara de arco de xenón tiene una distribución de energía espectral próxima a la iluminación del día.
Monocromador
Constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. El monocromador aísla las radiaciones de las longitudes de onda deseadas apartir de las radiaciones heterocromáticas que inciden o se reflejan desde el objeto.
Rendija de entrada: Sirve como una fuente para el monocromador. Es un rectángulo largo y estrecho que proporciona una mayor resolución de la longitud de onda de la energía dispersada, y su longitud permite tener suficiente energía en el sistema como para producir una señal manejable posteriormente.
Rendija desalida: Determina la banda de paso en términos de la longitud de onda de la energía que alcanza el detector de la muestra.
Colimador: Permite dirigir los rayos que emanan de la rendija de entrada de forma que los rayos provenientes de todas las posiciones de la rendija llegan al elemento de dispersión con el mismo ángulo. El segundo colimador forma una imagen de la rendija de entrada, después...