Estudio De La Bomba De Protones
Páginas: 9 (2243 palabras)
Publicado: 7 de junio de 2012
ESTUDIO DEL BOMBEO DE PROTONES POR LEVADURAS; EFECTO DE LOS INHIBIDORES DE LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES Y DE LOS DESACOPLANTES
NOMBRES CODIGO
NOMBRES CODIGO
Departamento de NO SEEEEE, Facultad de NO SEEEE
Universidad de Nariño, San Juan de Pasto. A.A. 1175
RESUMEN
A partir de la hipótesis planteada acerca del consumo de glucosa por las levaduras (Saccharomyces cerevisiae), seanalizó la acción de las bombas de protones localizadas en la pared celular y la membrana mitocondrial. Se realizaron tres experimentos; el de control usando glucosa únicamente; el del dinitrofenol que es un agente desacoplante e impide la fosforilación de ADP a ATP y el de la azida de sodio que es un inhibidor de la fosforilación oxidativa. A partir de estos experimentos se determino el pH enintervalos de tiempo y se analizo el significado de los cambios de pH. Se comprobó la hipótesis planteada “Si las levaduras consumen glucosa, se observara una disminución progresiva de su concentración en el medio de cultivo con el tiempo y cambios de pH extracelular”, y además se identifico la acción de los agentes químicos desacoplantes e inhibidores.
Palabras clave: fosforilacion oxidativa, bombade protones, agentes desacoplantes e inhibidores.
INTRODUCCION
La levadura de panadería (Saccharomyces cerevisiae), es un hongo microscópico unicelular de gran importancia como modelo biológico, debido a su baja facilidad estructural y a la facilidad con la que se obtienen grandes cantidades de este microorganismo.
Las levaduras poseen una membrana plasmática en la que los flujos deiones están constituidos principalmente por los movimientos de protones y potasio. El ciclo para estos iones en la membrana plasmática se inicia con la salida de protones proveniente de la hidrólisis del ATP y la generación del potencial electroquímico, producido por la H+- ATPasa. El gradiente de protones producido por esta enzima, puede llegar a ser mayor de 3 unidades de pH y constituye lamayor parte de la energía que la célula requiere para impulsar el transporte de iones; además, la acidificación del medio impide el crecimiento de otros microorganismos. Las levaduras también poseen una bomba de protones en la membrana mitocondrial interna que se encarga de permitir la síntesis de ATP en la cadena transportadora de electrones o cadena respiratoria la cual está constituida por un grupode enzimas acopladas que catalizan la oxidación y reducción como la pérdida o ganancia de electrones en un proceso denominado fosforilación oxidativa.
El combustible principal para que el metabolismo celular y todos estos procesos funcionen es la glucosa y de hecho, casi todos los organismos la utilizan y la procesan de forma similar; esta glucosa entra en las células y se degrada por la víaglucolítica que produce diferentes compuestos que van a ir a la cadena transportadora de electrones para formar el ATP por medio de las bombas de protones que se desarrollan en las membranas. Aún así, a pesar de la eficiencia de este mecanismo, en la cadena transportadora de electrones y a nivel de los complejos, existen ciertas sustancias desacoplantes que inhiben la fosforilación de ADP, comopor ejemplo, el 2,4-Dinitrofenol y algunos antibióticos. Por otro lado existen inhibidores fuertes como las azidas que también intervienen en la cadena respiratoria, específicamente a nivel del complejo IV.[1]
METODOLOGIA
Experimento 1: fue el experimento de control en el que se diluyo 5 ml de la levadura con 40 ml de agua destilada y se determino el pH de la solución en intervalos de 3minutos; seguidamente se adiciono 5 mL de glucosa al 10% agitando y midiendo el pH, por ultimo se determino el pH de la solución en intervalos de 5 minutos por 20 minutos y luego en intervalos de 10 minutos por 20 minutos mas.
Experimento 2: fue el experimento en el que se uso el desacoplante dinitrofenol; se diluyo 5 ml de levadura con 40 ml de agua destilada y por decantación se adiciono a...
NOMBRES CODIGO
NOMBRES CODIGO
Departamento de NO SEEEEE, Facultad de NO SEEEE
Universidad de Nariño, San Juan de Pasto. A.A. 1175
RESUMEN
A partir de la hipótesis planteada acerca del consumo de glucosa por las levaduras (Saccharomyces cerevisiae), seanalizó la acción de las bombas de protones localizadas en la pared celular y la membrana mitocondrial. Se realizaron tres experimentos; el de control usando glucosa únicamente; el del dinitrofenol que es un agente desacoplante e impide la fosforilación de ADP a ATP y el de la azida de sodio que es un inhibidor de la fosforilación oxidativa. A partir de estos experimentos se determino el pH enintervalos de tiempo y se analizo el significado de los cambios de pH. Se comprobó la hipótesis planteada “Si las levaduras consumen glucosa, se observara una disminución progresiva de su concentración en el medio de cultivo con el tiempo y cambios de pH extracelular”, y además se identifico la acción de los agentes químicos desacoplantes e inhibidores.
Palabras clave: fosforilacion oxidativa, bombade protones, agentes desacoplantes e inhibidores.
INTRODUCCION
La levadura de panadería (Saccharomyces cerevisiae), es un hongo microscópico unicelular de gran importancia como modelo biológico, debido a su baja facilidad estructural y a la facilidad con la que se obtienen grandes cantidades de este microorganismo.
Las levaduras poseen una membrana plasmática en la que los flujos deiones están constituidos principalmente por los movimientos de protones y potasio. El ciclo para estos iones en la membrana plasmática se inicia con la salida de protones proveniente de la hidrólisis del ATP y la generación del potencial electroquímico, producido por la H+- ATPasa. El gradiente de protones producido por esta enzima, puede llegar a ser mayor de 3 unidades de pH y constituye lamayor parte de la energía que la célula requiere para impulsar el transporte de iones; además, la acidificación del medio impide el crecimiento de otros microorganismos. Las levaduras también poseen una bomba de protones en la membrana mitocondrial interna que se encarga de permitir la síntesis de ATP en la cadena transportadora de electrones o cadena respiratoria la cual está constituida por un grupode enzimas acopladas que catalizan la oxidación y reducción como la pérdida o ganancia de electrones en un proceso denominado fosforilación oxidativa.
El combustible principal para que el metabolismo celular y todos estos procesos funcionen es la glucosa y de hecho, casi todos los organismos la utilizan y la procesan de forma similar; esta glucosa entra en las células y se degrada por la víaglucolítica que produce diferentes compuestos que van a ir a la cadena transportadora de electrones para formar el ATP por medio de las bombas de protones que se desarrollan en las membranas. Aún así, a pesar de la eficiencia de este mecanismo, en la cadena transportadora de electrones y a nivel de los complejos, existen ciertas sustancias desacoplantes que inhiben la fosforilación de ADP, comopor ejemplo, el 2,4-Dinitrofenol y algunos antibióticos. Por otro lado existen inhibidores fuertes como las azidas que también intervienen en la cadena respiratoria, específicamente a nivel del complejo IV.[1]
METODOLOGIA
Experimento 1: fue el experimento de control en el que se diluyo 5 ml de la levadura con 40 ml de agua destilada y se determino el pH de la solución en intervalos de 3minutos; seguidamente se adiciono 5 mL de glucosa al 10% agitando y midiendo el pH, por ultimo se determino el pH de la solución en intervalos de 5 minutos por 20 minutos y luego en intervalos de 10 minutos por 20 minutos mas.
Experimento 2: fue el experimento en el que se uso el desacoplante dinitrofenol; se diluyo 5 ml de levadura con 40 ml de agua destilada y por decantación se adiciono a...
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