Estudio De La Mitosis En Celulas A Raiz De La Cebolla
♥Objetivo:
-El objetivo de esta práctica es observar e interpretar figuras de distintas fases de la mitosis en las células vegetales.
- Ejecutar adecuadamente la técnica de laboratorio en la preparación de placas permanentes de mitosis.
♥Introducción:
- Para la comprensión del sustrato celular de la herencia, es preciso analizar losmecanismos reguladores de eventos bioquímicos secuenciales y continuos en la célula. De igual forma para conocer lo que sucede en la célula durante la mitosis es preciso delimitar la trayectoria de los eventos que se llevan a cabo dentro de ella.
Este trabajo comprende una visión diferente a las anteriores de un proceso fundamental sucedido en todos los organismos eucariontes para generar nuevascélulas y nuevos organismos; el de la mitosis. Aunque el proceso de división celular ha sido caracterizado desde hace muchos años atrás en diversos tipos celulares, con diferentes técnicas y con diferentes instrumentos; en los resultados de este trabajo se muestran imágenes obtenidas in situ con el Microscopio de Fuerza Atómica de células de raíz de cebolla en división celular.
En la elaboración deeste trabajo principalmente se usó el Microscopio de Fuerza Atómica [6], un instrumento que en las ciencias biológicas tiene tan sólo algunos años en haberse empezado a usar, su mecanismo permite obtener imágenes reales y en tercera dimensión de la muestra en estudio además de ofrecer una resolución mayor al Microscopio Electrónico de Transmisión [7]. En el AFM una aguja “barre” el relievede la muestra y por medio de un programa de cómputo lo transforma en una observación que puede ser interpretada como una imagen en tercera dimensión. La muestra referida es un corte muy delgado (0.2 µm) de la punta de una raíz de cebolla que fue procesada con la técnica convencional de microscopía electrónica [8].
♥Material empleado:
* Microscopio * Portaobjetos * Cubreobjetos *Lanceta estéril * Cubeta de tinción * Aguja enmangada * Pinzas * Palillos | * Frasco lavador * Mechero de alcohol * Tijeras * Papel de filtro * Vaso de precipitados * Vidrio de reloj * Orceína A * Orceína B |
♥ Procedimiento:
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1. Llenar un vaso de precipitados con agua y colocar un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres palillos de manera que la parte inferiorquede inmersa en el agua. Al cabo de 3-4 días aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm de longitud. 2. Cortar con las tijeras unos 2-3 mm del extremos de las raicillas y depositarlo en un vidrio de reloj en el que se han vertido 2-3 ml de orceína A. 3. Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 8 minutos, evitando la ebullición, hasta laemisión de vapores tenues. 4. Con las pinzas tomar uno de los ápices o extremos de las raicillas y colocarla sobre un portaobjetos, añadir una gota de orceína B y dejar actuar durante 1 minuto. 5. Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una aguja enmangada dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que la raíz quede extendida. 6. Sobre la preparacióncolocar unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Poner el dedo pulgar sobre el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y hacer una suave presión, evitando que el cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se realice. 7. Observar al microscopio. |
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♥ Dibujos:
♥Observaciones:
- Se observarán células dispersas por todo el campo devisión, en diversas fases de la división celular. Los cromosomas se pueden apreciar teñidos de morado por la orceína. El aspecto reticulado y el mayor tamaño de algunos núcleos corresponden a células en los procesos iniciales de la división mitótica.
- Los resultados muestran diferentes figuras mitóticas a partir de cortes de material biológico incluido en epon, muy similares a lo observado...
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