Estudio Microscopico De Las Bacterias
Páginas: 14 (3273 palabras)
Publicado: 3 de octubre de 2012
Laboratorio/Microbiologia
PRACTICA #2
ESTUDIO MICROSCOPICO DE LAS BACTERIAS
OBJETIVO DE LA PRACTCA
Desarrollar las técnicas microscopicas comunes para observar, teñir y medir a las bacterias y sus estructuras.
INTRODUCCION
El tamaño tan pequeño de las bacterias oscila entre 0.5 a 2.0 micrómetros de diámetro. En cuanto a su forma, las bacterias se agrupan en trestipos principales:
Bacilos.- Sus extremos pueden ser redondos, angulares o agudos y pueden ser móviles o inmóviles; también pueden agruparse en dos o en cadenas.
Cocos o curvos.- Estas bacterias esféricas pueden presentarse solas, en pares, en tretadas, en cadenas o en racimos.
Helicoidales.
El estudio microscópico de las bacterias se facilita notablemente al tratarlas con colorantes otintes, apreciándose su forma y tamaño.
TECNICAS DE TINCION
1.- Tinción simple o directa
Tiñen homogeneamente la célula y solo utilizan un colorante, que puede ser azul de metileno, safranina, cristal violeta, etc.
2.- Tinción compuesta o diferencial
Requieren combinaciones de dos o más colorantes, como en la técnica de Gram, la de Ziehl Neelsen, tinción de esporas, etc.
Algunasde estas tecnicas permiten la demostración de estructuras especificas como capsula, flagelos, esporas, etc.
← Tinción de Gram
Esta tinción separa las bacterias en dos grandes grupos, las Gram positivas que retienen el primer colorante usado (cristal violeta), tienen una pared gruesa de péptidoglucano y las Gram negativas que se tiñen con el segundo colorante (safranina), contienen menospéptidoglucano y su capa es mucho más delgada, pero que esta rodeada de una bicapa más externa de lípidos, llamada membrana externa.
← Técnica acidorresiente (de Ziehl-Neelsen)
Por este procedimiento se distinguen los géneros Mycobacterium y Nocardia de cualquier otra bacteria, debido a que retienen el primer colorante, por lo que son llamadas acidorresistentes. Las no acidorresistentes setiñen de azul.
← Observación de Cápsula
La cápsula es una capa gruesa de polisacárido, más externa a la pared celular que rodea a la bacteria y esta adherida a ella. Sus dos funciones principales son favorecer su adhesión a las superficies y protegerla de los predadores.
La cápsula es difícil de teñir con colorantes, por lo que se recurre a tinciones negativas.
← Tinción de endosporasbacterianas
Ciertos géneros de bacteias como Bacilus, Clostridium, Desulfotomaculum, Sporolactobacillus, Thermoactinomyces y Sporosarcina, producen endoesporas, estructuras no reproductivas resistentes a las condiciones ambientales adversas, así como al calor y a los componentes químicos. Cada célula da una espora y cada espora da una célula.
3.- Tinciones negativas
En realidad no colorean losmicroorganismos, se limitan a depositarse en el campo del rededor, delimitando las células.
CUESTIONARIO
Explique el mecanismo químico de la tinción de Gram, refiriendo la reacción entre los reactivos y los componentes de la pared celular.
En la tinción de Gram se forma un complejo de cristal de Iodo insoluble en el interior de la célula, en el caso de las bacterias GRAM (-) puedeextraerse con alcohol, pero no en las bacterias GRAM (+). El resultado es el cierre de los poros de las paredes impidiendo el rescate del complejo de cristal de Iodo insoluble. En las bacterias GRAM (-), el alcohol penetra rápidamente en la capa externa que es rica en lípidos sin que la fina capa de péptidoglucano evite el paso del solvente, permitiendo de este modo la eliminación y el complejo decristal de Iodo insoluble.
Explique el mecanismo quicio de la reacciona de Ziehl-Neelsen.
Mycobacterium y Nocardia usualmente presentan un alto contenido de lípidos, hasta 60% del peso de la pared, lo que hace difícil la tinción, debido a que los iones del colorante no penetran rápido a través de las capas de lípidos. Para facilitar la entrada del colorante se calienta; una vez teñidas,...
PRACTICA #2
ESTUDIO MICROSCOPICO DE LAS BACTERIAS
OBJETIVO DE LA PRACTCA
Desarrollar las técnicas microscopicas comunes para observar, teñir y medir a las bacterias y sus estructuras.
INTRODUCCION
El tamaño tan pequeño de las bacterias oscila entre 0.5 a 2.0 micrómetros de diámetro. En cuanto a su forma, las bacterias se agrupan en trestipos principales:
Bacilos.- Sus extremos pueden ser redondos, angulares o agudos y pueden ser móviles o inmóviles; también pueden agruparse en dos o en cadenas.
Cocos o curvos.- Estas bacterias esféricas pueden presentarse solas, en pares, en tretadas, en cadenas o en racimos.
Helicoidales.
El estudio microscópico de las bacterias se facilita notablemente al tratarlas con colorantes otintes, apreciándose su forma y tamaño.
TECNICAS DE TINCION
1.- Tinción simple o directa
Tiñen homogeneamente la célula y solo utilizan un colorante, que puede ser azul de metileno, safranina, cristal violeta, etc.
2.- Tinción compuesta o diferencial
Requieren combinaciones de dos o más colorantes, como en la técnica de Gram, la de Ziehl Neelsen, tinción de esporas, etc.
Algunasde estas tecnicas permiten la demostración de estructuras especificas como capsula, flagelos, esporas, etc.
← Tinción de Gram
Esta tinción separa las bacterias en dos grandes grupos, las Gram positivas que retienen el primer colorante usado (cristal violeta), tienen una pared gruesa de péptidoglucano y las Gram negativas que se tiñen con el segundo colorante (safranina), contienen menospéptidoglucano y su capa es mucho más delgada, pero que esta rodeada de una bicapa más externa de lípidos, llamada membrana externa.
← Técnica acidorresiente (de Ziehl-Neelsen)
Por este procedimiento se distinguen los géneros Mycobacterium y Nocardia de cualquier otra bacteria, debido a que retienen el primer colorante, por lo que son llamadas acidorresistentes. Las no acidorresistentes setiñen de azul.
← Observación de Cápsula
La cápsula es una capa gruesa de polisacárido, más externa a la pared celular que rodea a la bacteria y esta adherida a ella. Sus dos funciones principales son favorecer su adhesión a las superficies y protegerla de los predadores.
La cápsula es difícil de teñir con colorantes, por lo que se recurre a tinciones negativas.
← Tinción de endosporasbacterianas
Ciertos géneros de bacteias como Bacilus, Clostridium, Desulfotomaculum, Sporolactobacillus, Thermoactinomyces y Sporosarcina, producen endoesporas, estructuras no reproductivas resistentes a las condiciones ambientales adversas, así como al calor y a los componentes químicos. Cada célula da una espora y cada espora da una célula.
3.- Tinciones negativas
En realidad no colorean losmicroorganismos, se limitan a depositarse en el campo del rededor, delimitando las células.
CUESTIONARIO
Explique el mecanismo químico de la tinción de Gram, refiriendo la reacción entre los reactivos y los componentes de la pared celular.
En la tinción de Gram se forma un complejo de cristal de Iodo insoluble en el interior de la célula, en el caso de las bacterias GRAM (-) puedeextraerse con alcohol, pero no en las bacterias GRAM (+). El resultado es el cierre de los poros de las paredes impidiendo el rescate del complejo de cristal de Iodo insoluble. En las bacterias GRAM (-), el alcohol penetra rápidamente en la capa externa que es rica en lípidos sin que la fina capa de péptidoglucano evite el paso del solvente, permitiendo de este modo la eliminación y el complejo decristal de Iodo insoluble.
Explique el mecanismo quicio de la reacciona de Ziehl-Neelsen.
Mycobacterium y Nocardia usualmente presentan un alto contenido de lípidos, hasta 60% del peso de la pared, lo que hace difícil la tinción, debido a que los iones del colorante no penetran rápido a través de las capas de lípidos. Para facilitar la entrada del colorante se calienta; una vez teñidas,...
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