Etica

4. ETAPAS
-Desarrollo y amplificación de las bacterias.
-Cultivación y rompimiento de las bacterias.
-Purificación del ADN plasmídico.
La desnaturalización alcalina también llamada lisisalcalina, nos sirve de molde para poder entender y realizar ciertos métodos que se utilizan para la extracción de ADN plasmídico. El proceso comienza creando un ambiente osmótico hostil para poderposteriormente lograr la rotura de la membrana celular mediante la aplicación de detergentes que son el dodecilsulfato sódico (SDS) y el hidróxido de sodio (NaOH). A partir de esto se tiene unresultado de pH de aproximadamente 12, no obstante las moléculas circulares cerradas por un enlace covalente sufren una desnaturalización de manera parcial. Para poder neutralizar el extracto celularse necesita añadir ácido acético con una alta concentración salina para de esta forma tener un ADN cromosomal precipitado. Posteriormente se añade acetato de potasio a nuestro ADN cromosomal parapoder formar un agregado junto con el SDS y proteínas bacterianas el cual se precipita, mientras que el ADN plasmídico queda estable en la solución. Para terminar con este proceso, se utilizaetanol para obtener del ADN plasmídico.
5. Este proceso consiste en que las células obtengan DNA libre el cual lo van a capturan de su entorno. Esto ocurre de manera natural en muchas de lasbacterias, lo importante de esto es que el fenómeno varía entre una especie a otra. Para poder lograr la transformación, la bacteria debe estar en un estado de competencia, de este modo, presentaráciertas alteraciones en su membrana así como en su pared, lo cual va a permitir una entrada de ácidos nucléicos en la célula.

Bibliografía
Río J. (2010) Transformación de células. Temuco, Chile:Universidad de La Frontera.
Prieto Álamo J, et al. (2008) Purificación de ácidos nucléicos. Córdoba, España. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Campus Universitario de Rabanales...