EVALUACION DEL EFECTO DESACOPLANTE DE DINITROFENOL E INHIBIDOR DE LA AZIDA EN LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES Y LA FOSFORILACION OXIDATIVA PARA LAS LEVADURAS.
Lasso VA1, Rosero DA1, Bustos JS1
1. Estudiantes de segundo semestre del programa de Medicina de la Universidad de Nariño, Pasto (Colombia)
RESUMEN:
Con el propósito de evaluar los efectos del desacoplante dinitrofenol y elefecto inhibidor de la azida en la cadena de transporte de electrones y la fosforilación oxidativa, para las levaduras. Así se realizó tres experimentos en donde se compara por medio del pH, como las levaduras obtienen su energía y que en realidad no se ven afectadas ni por el dinitrofenol ni por la azida debido a que estas levaduras tiene la facultad de crecer en medios anaerobios por ende suobtención de energía no es obligatoriamente la respiración y obtiene su energía por medio de fermentación.
De esta manera podemos correlacionar que estos inhibidores y desacoplantes afectaran significativamente solo a los organismos aerobios obligados, debido a que perturbara de forma negativa la producción de energía en la respiración.
PALABRAS CLAVES: levaduras, fermentación, inhibidor,desacoplante, cadena de transporte de electrones, fosforilación oxidativa.
INTRODUCCION:
En la respiración celular un proceso en donde la energía química de las sustancias alimenticias, carbohidratos, lípidos y proteínas se convierte en energía utilizable para las células, en forma de ATP. Este proceso se realiza en todas las células eucariotas y en algunos procariotas. En las células eucariotas larespiración tiene lugar en la mitocondria y en la membrana plasmática de bacterias aerobias.
En las células existen dos tipos de procesos para la liberación de energía, la respiración aerobia y la anaerobia o fermentación, estos se diferencian principalmente el uso de oxigeno como agente reductor.
Para el experimento se evaluó porque el consumo de carbohidratos (glucosa y sacarosa) no sevieron afectados por el 2,4-dinitrofenol que es un agente desacoplante, es decir, desacopla la cadena de transporte de electrones de la fosforilación oxidativa. El desacoplamiento se produce ya que el 2,4-dinitrofenol hace permeable a los protones la membrana interna mitocondrial deshaciendo la relación obligada entre la cadena respiratoria y la fosforilación oxidativa. El efecto de este veneno portanto es la inhibición de la producción de ATP al no generarse el gradiente de pH, pero si permite que la cadena de transporte de electrones continúe funcionando.
Y por qué el inhibidor tampoco afecto el consumo de glucosa y sacaros sabiendo que es capaz de inhibir a la enzima citocromo c oxidasa formando un enlace irreversible, en un proceso similar al realizado por el monóxido de carbono. METODOLOGÍA:
En primera instancia se realizó un experimento control donde se diluyó 5mL de levadura la 200mg/mL con 40mL de agua destilada, posteriormente se tomó el pH de las soluciones 3 veces con intervalos de 3 minutos, con estos resultados se obtuvo la línea basal.
Se añadió en una de las muestras 5mL de sacarosa y en el otro 5mL de glucosa al 10%, a las cuales se les midió el pH con un pHmetro. Realizado esto se tomó el pH de cada muestra 4 veces durante intervalos de 5 minutos y finalmente 2 veces con intervalos de 10 minutos. Terminado con esto se realizó dos experimentos evaluando los efectos del dinitrofenol y azida.
Para el procedimiento con dinitrofenol se realizó las diluciones de levadura (5mL) con 40 mL de agua y se le añadió dinitrofenol 40mmol/L, de igual forma sedeterminó el pH de las soluciones y se repitió la medida del pH con intervalos de 3 minutos, dos veces más. Tras esperar 5 minutos se añadió glucosa y sacarosa siguiendo los mismos pasos del experimento control mencionado en la primera parte, ejecutando las medidas del pH con iguales intervalos de tiempo.
Finalmente para el experimento con azida se realizó el mismo procedimiento mencionado en el...
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