Evaluación de la inmunidad celular-microscopia-cultivo

EVALUACIÓN DE LA INMUNIDAD CELULAR
La prueba empleada normalmente para evaluar la respuesta del paciente a la exposición a M. tuberculosis es la prueba cutánea de la tuberculina. La reactividad a la inyección intradérmica
de antígenos micobacterianos puede diferenciar las personas infectadas de las no infectadas. El único indicio de infección por micobacterias en muchos pacientes es unareacción cutánea positiva que dura toda la vida, junto con los indicios radiológicos de la calcificación de focos que inicialmente fueron activos en el pulmón o en otros órganos. Las pruebas con antígenos proteicos extraídos de M. tuberculosis han sido las más frecuentes y son las mejor estandarizadas,
aunque también se han desarrollado pruebas cutáneas con otros antígenos micobacterianos específicos deespecie.

Los métodos de preparación de los antígenos e inoculación cutánea han cambiado en múltiples ocasiones desde que se desarrollaron por primera vez. El antígeno tuberculínico que se recomienda en la actualidad es el derivado proteico purificado de la pared celular. En esta prueba, una cantidad determinada de antígeno (0,1 ug [5 unidades de tuberculina] de PPD) se inocula por víaintradérmica en la piel del paciente. La reacción de la piel se determina después de un período de 48 horas. El tipo de paciente define de forma distinta la reacción positiva (tabla 29-3). Una reacción PPD positiva se produce generalmente entre 3 y 4 semanas después de la exposición a M. tuberculosis. La exposición a otras micobacterias puede hacer que un paciente presente reactividad cruzada con latuberculina, pero la reacción presenta generalmente una induración
menor de 10 mm. Los pacientes infectados por M. tuberculosis pueden no mostrar ninguna respuesta a la prueba cutánea de la tuberculina si son anérgicos (carentes de reacción al antígeno, lo que es especialmente cierto en los pacientes infectados por VIH); por tanto, se deben usar siempre antígenos de control en las pruebas de latuberculina.
La reactividad a la lepromina, la cual se prepara a partir de M. leprae inactivado, tiene valor para confirmar el diagnóstico clínico de lepra tuberculoide. La induración papular se desarrolla entre 3 y 4 semanas después de la inyección intradérmica del antígeno. Esta prueba no es útil para la identificación de los pacientes con lepra lepromatosa porque dichos pacientes son anérgicos alantígeno.

Recientemente se ha desarrollado y aprobado por la Food and Drug Administration (FDA) estadounidense una prueba alternativa a la prueba cutánea de la tuberculina basada en
la cuantificación del interferón-Y (IFN-y) liberado por linfocitos sensibilizados a la sangre del paciente tras su incubación durante la noche con PPD. Aunque se considera que esta prueba (prueba QuantiFERON-TB) se veinfluida en menor medida por el sesgo y el error del observador, su sensibilidad y especificidad no superan a las descritas para la prueba cutánea.

MICROSCOPÍA
La detección microscópica de los bacilos acidorresistentes en las muestras clínicas es el método más rápido para confirmar la enfermedad por micobacterias. La muestra clínica se tiñe con carbolfucsina (métodos de Ziehl-Neelsen o deKinyoun) o con colorantes fluorescentes de auramina-rodamina (método del fluorocromo de Truant), se decolora con una solución de ácido alcohol y a continuación se aplica una tinción de contraste. Las muestras se examinan con un microscopio óptico o con un microscopio de fluorescencia en el caso de utilizar colorantes fluorescentes. El método del fluorocromo de Truant es más sensible porque la muestrase puede observar rápidamente con bajo aumento para zonas de fluorescencia, y posteriormente se
confirma la presencia de bacterias acidorresistentes con un mayor aumento.

Se detecta la presencia de bacilos mediante tinciones de ácido alcohol al microscopio en una tercera parte a una mitad de las muestras con resultados positivos en el cultivo. La sensibilidad de esta prueba es elevada en:...