Evaluación del uso del coagulo y sangre total para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas mediante la PCR en tiempo real
Janet Acosta1*, Leny Sanchez1, Milagros Bastos1, Maritza Calderon1,Robert H. Gilman1,2
1 Laboratorio de Investigación en Enfermedades Infecciosas-LIEI- Universidad Peruana Cayetano Heredia. Lima-Perú. 2 Dpto. International Health, Johns Hopkins University,Bloomberg School of Hygiene and Public Health, Baltimore, Maryland- Estados Unidos.
*jamnethe5@gmail.com
La PCR a tiempo real (PCR-TR) ofrece la ventaja de ser más sensible y específica quelas técnicas actualmente utilizadas para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas, como son la microscopia y las técnicas serológicas. Además, los procesos de amplificación y detección se producende manera simultánea en el mismo vial cerrado, sin necesidad de ninguna acción posterior lo cual minimiza probables problemas de contaminación. Actualmente los laboratorios que realizan diagnosticoutilizan generalmente la sangre total y en algunos casos coagulo como fuente de ADN, en consecuencia, el objetivo fue evaluar los dos tipos de muestra para definir cuál es la más adecuada en laoptimización del resultado y reproducibilidad de la técnica.
El objetivo de la presente investigación fue determinar la sensibilidad y especificidad de la técnica de PCR-TR en coagulo y sangre total. Paraello, se analizaron muestras tomadas con y sin anticoagulante (sangre total y coágulo) de 52 pacientes provenientes de Cochabamba-Bolivia con resultados positivos y negativos a serología por técnicasde ELISA y ELISA recombinante (WIENER) utilizados como Gold estándar, de los cuales 18 fueron positivos y 34 negativos. Para la realización de la PCR-TR se utilizaron los iniciadores que amplifican unfragmento de 166 pb de la secuencia del gen de la región satelital del ADN nuclear de T. cruzi.
La PCR-TR tuvo una sensibilidad del 39% (7/18) en muestras de coagulo en comparación con el 28%...
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