Excreció d'àcid salicílic en rata amb modificació de pH d'orina

Excreció d'àcid salicílic en rata amb modificació de pH d'orina

RESUM
L'excreció de salicilat mostra diferències tot depenent del pH de l'orina. En aquest
experiment s'ha modificat l'orina de rates, en dues s'ha alcalinitzat i en dues s'ha
basificat. Amb l'administració posterior d'àcid acetilsalicílic, s'ha mostrejat i calculat el
pH de l'orina i el tant per cent d'àcid salicílic excretatper cadascuna de les rates
mitjançant tiretes indicadores de pH i lectures de les mostres en el espectrofotòmetre
respectivament. Les rates amb orina àcida han mostrat una excreció menor d'àcid
salicílic que les rates amb orina bàsica.

INTRODUCCIÓ
La modificació del pH de l'orina és una eina molt utilitzada en medicina. S'ha fet servir
durant molt de temps per combatre casosd'intoxicació, acidificant o basificant l'orina
tot depenent de les característiques físico-químiques del fàrmac o substància tòxica a
excretar1, 2.
En pràctiques de laboratori universitaris, és comú fer experiments d'aquest tipus amb
rates, donada la seva fàcil manipulació i relativament baix cost econòmic. Consta d'una
pràctica senzilla amb la qual s'obtenen resultats en un temps relativament curt per afer un estudi farmacocinètic clar i entenedor de l'excreció d'un fàrmac amb modificació
d'orina de la rata. El fàrmac que es quantificarà serà l’àcid salicílic (SA). Aquest fàrmac
es el metabòlit actiu de l’àcid acetilsalicílic. Quan administrem l’àcid acetilsalicílic, es
metabolitza, quasi immediatament, mitjançant les esterases plasmàtiques donant àcid
salicílic, essent aquest últim elresponsable de l’acció farmacològica1.

MATERIAL I MÈTODES
Es va experimentar amb quatre rates, (un grup de sis persones per rata) seguint el
"Reglament de la Comissió d'Ètica en l'Experimentació Animal i Humana de la UAB"
1

que està sota les directrius de la "Normativa de la Unió Europea sobre l'ús d'animals en
experiments".
Primerament, es va administrar via oral 400 mg/Kg de clorurd'amoni (CINH4) a dues
rates (numerades 1 i 2) i 400 mg/Kg de bicarbonat sòdic (NaHCO3) a les dues restants
(numerades 3 i 4), a una dosi de 1ml de solució cada 100g de pes. Cada animal va
romandre dins d'una gàbia metabòlica durant 30-45 minuts amb la finalitat que els
tractaments fessin el seu efecte. En aquest estadi es va reservar orina de les quatre
rates per fer el blanc enl'espectrofotòmetre. Seguidament es van treure les quatre
rates de les gàbies metabòliques i se'ls hi va administrar una dosi intraperitoneal de
300 mg/Kg de salicilat sòdic a una concentració de 1ml cada 100g de pes. Tot seguit es
van introduir un altre cop dins de les gàbies metabòliques per tal de recollir l'orina
durant una hora.
De cada rata es van obtenir diferents mostres d'orina. De cadascuna d'elles,es va
mesurar el volum d'orina, es va quantificar la concentració d'àcid salicílic i es va
mesurar el pH de l'orina fent servir tiretes indicadores de pH.
La quantificació de l'àcid salicílic es va basar en una reacció colorimètrica. El
procediment va ser el següent: cada grup va fer servir tantes cubetes com mostres
d'orina van recollir més una per fer el blanc en l'espectrofotòmetre. En laprimera
cubeta i per fer el blanc, es va dipositar 100μl de l'orina reservada anteriorment i 900μl
de nitrat fèrric Fe(NO3)3. Es va fer el mateix procediment per cadascuna de les
respectives mostres d'orina excretada per la rata de cada grup. Seguidament es va fer
el blanc en l'espectrofotòmetre de la primera mostra a 520nm, per després mesurar
l'absorbància de les mostres amb la concentracióproblema de fàrmac.
Per fer els càlculs de concentració d'àcid salicílic problema, es va fer una recta de
calibratge amb concentracions de fàrmac conegudes per tal de treure la recta de
regressió i interpolar-ho amb les mostres problema. Per fer aquests càlcul es va fer
servir una calculadora científica. Per fer les taules i el diagrama de barres amb els
resultats obtinguts, es va fer...