Exoglicosidasas

Francisco Javier Ramírez Carbajal A00889696
Enzimología y Biocatálisis Lunes 16:00hrs
Prof. Alejandro Olmos Dichara

Actividad de las exoglicosidasas lisosomales en gliomas humanos

Mucha de la información existente parece indicar que los glicoconjugados, como las glicoproteínas, los glicolípidos y los proteoglicanos, pueden ser relevantes en el desarrollo de ciertos tipos de cáncer. Este tipode compuestos forman parte de múltiples procesos celulares como la diferenciación, crecimiento y proliferación y la interacción célula-célula, a nivel de órganos ayudan por ejemplo al desarrollo del tejido cerebral, a la estabilización estructural y funcional de neuronas y células gliales y juegan un rol importante en la neurotransmisión. Son los elementos principales en la formación de la MatrizExtracelular (ECM por sus siglas en inglés) y las Membranas de Soporte (BS por sus siglas en inglés) de tal forma que generan una especie red o tejido en los vasos sanguíneos que actúa de barrera para células y moléculas, la degradación de la ECM y las BS son uno de los pasos en el desarrollo, metástasis e invasión a través de vasos linfáticos y sanguíneos causado por enzimas asociadas a tumores.Dentro de los diferentes tumores que se pueden presentar en el tejido cerebral el más común son los gliomas, que como su nombre lo sugiere inician en células gliales, y se caracterizan por una alta actividad biológica y una vascularización considerable, a diferencia de otros tipos de tumores, los gliomas producen metástasis muy rara vez y aún se desconocen las causas de este proceso, sin embargoactualmente no existen tratamientos lo suficientemente efectivos y en muchos casos de remoción de los tumores por vía quirúrgica existe una tasa de mortalidad del 90% después de dos años, debido a que como se mencionaba anteriormente su gran actividad biológica, en especial los tipos III y IV.
Los estudios bioquímicos están siendo ampliamente usados para la detección de tejidos con cáncer, seempiezan a notar cambios como una modificación cuantitativa y cualitativa de las cadenas de oligosacáridos de los glicoconjugados y una actividad enzimática anormal en el área donde se localiza propiamente el tumor y sus alrededores. Los estudios sugieren que se genera una actividad de degradación de los glicoconjugados por enzimas lisosomales lo que facilita que las células cancerosas se infiltren aotros tejidos y a los vasos sanguíneos. Las exoglicosidasas son hidrolasas ácidas lisosomales que actúan en la degradación y reconstrucción de glicoconjugados liberando grupos funcionales de los monosacáridos de cadenas de azúcares. Las glicosidasas actúan sobre las glicoproteínas en la parte exterior de las células cambiando su estructura, aunque no se entienden aún de manera clara los mecanismosen los que se permite el desarrollo del tumor si se cree que estas enzimas están altamente relacionadas ya que su actividad se ha visto incrementada en diferentes tipos de tumores (no sólo en células gliales). En el artículo buscan determinar la actividad enzimática de diferentes exoglicosidasas (β-hexosaminidasa y sus isoenzimas A y B, β-galactosidasa y α-manosidasa) en diferentes gliomas paraentender cómo actúan en la transformación de células gliales normales a células malignas y su potencial habilidad para generar metástasis.
Los tejidos se obtuvieron del Departamento de Neurocirugía de la Universidad Médica de Bialystok, en total fueron 29, todos extraídos de gliomas humanos: 6 astrocitomas (grado I), 6 astrocitomas anaplásicos (grado III), 4 oligodendrogliomas anaplásicos (grado III)y 13 glioblastomas multiformes (grado IV). Por otro lado el grupo control fue generado a partir de tejido cerebral normal extraído de manera rutinaria junto con los tumores, todos los tejidos fueron lavados en soluciones salinas y conservados a -80°C hasta su uso.
Para el ensayo enzimático se suspendió 1gr de tejido en 4ml KCl al 0.9% y Triton X-100 al 0.2% y homogeneizados en un baño de hielo,...