experimento 8 bioquimica

Localización y demostración de la actividad de la citocromo-oxidasa (Experimento 4)
Objetivo
Observar la localización de la actividad de la enzimacitocromo-oxidasa en el organismo de un ratón, tal como lo hizo Ehrlich en 1885, inyectando alfa naftol y dimetil-para-fenilendiamina (formando una sustanciaazul llamada azul de indofenol) en animales.
Resultado
Tubo
Tiempo min. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 - - - - - - - - - -
10 x x x x x  x x x x
20 - - - - -- - - - -
30 - - - - - - - - - -

Análisis





1) Escriba la reacción del azul de indofenol

2) Explique por qué no se uso vaselina en esteexperimento
Porque la vaselina aísla el oxígeno del azul de indofenol reducido y para su aparición, la solución debe oxidarse (por acción del O2 delambiente).
3) Explique sus resultados sobre la base del análisis del contenido de cada tubo.
En los tubos 1, 2, 3, 4 y 5 no dio positiva la reacción porque aesos tubos se le agrego sobrenadante de hígado y el sobrenadante no contenía las mitocondrias que es donde se encuentra la citocromo-oxidasa.
En los tubos 7,8, y 9 no dio positiva la reacción por que a cada tubo le falto algún reactivo.
El tubo 10 pudo haber dado positiva la reacción sin embargo no diopositiva porque se le agrego KCN que es un inhibidor para que se lleve a cabo la reacción.

Conclusión
La actividad de la citocromo-oxidasa que es la ultimaenzima de la cadena respiratoria (responsable de la “activación del oxigeno”) se encuentra en las mitocondrias y esta enzima es muy sensible a los cianuros.