Experimento de Griffith

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CAMPUS DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y AGROPECUARIAS
LIC. BIOLOGÍA MARINA
3er semestre
Genética general
Experimentos de Griffith, McCarty, Hershey.
Mecanismos de reparación del ADN.
Dr. Carlos González Salas
Elaborado por:
Coeto Castillo Edgar Gerardo
Mérida, Yucatán a 10 de octubre de 2014
Experimento de Griffith o del principio transformante.
La historiadel descubrimiento de la composición química de los genes se inicia en 1928, cuando el médico inglés Frederick Griffith realizaba sus experimentos de infección de ratones con la bacteria del neumococo. La inoculación de estas bacterias en los ratones causa su muerte en 24 horas y su patogenicidad se debe a la cápsula de polisacáridos que poseen por fuera de su pared celular. Esta cápsula le otorgaa las colonias de neumococos un aspecto brillante o liso, denominado S. Existen mutantes de neumococos que no producen la cápsula de polisacáridos y forman colonias de aspecto rugoso o R. Griffith descubrió que estas mutantes no mataban a los ratones. Pero sin embargo, si mezclaba a los neumococos R con neumococos S previamente muertos por calor, entonces los ratones se morían. Aún más, en lasangre de estos ratones muertos Griffith encontró neumococos con cápsula (S). Es decir que en las bacterias S muertas había “algo” capaz de transformar a las bacterias R en patógenas y este cambio era permanente y heredable. Más tarde se demostró que esta transformación también se producía si se incubaban los neumococos R con un extracto libre de células S.
El médico microbiólogo Oswald Avery sepropuso descubrir la sustancia responsable del fenómeno de transformación, junto a sus colegas Colin MacLeod y Maclyn McCarty comenzaron a fraccionar el extracto de bacterias S libre de células donde, según Griffith, estaba el principio transformante. Encontraron que podían eliminar las proteínas, los lípidos, los polisacáridos y el ARN del extracto sin disminuir la propiedad del extracto detransformar a los neumococos R en S. Sin embargo, si purificaban el ADN presente en el extracto y lo incubaban con las bacterias R, éstas se transformaban en S. Era el ADN el principio transformante que hacía que los neumococos R se transformaran en S, es decir, era el ADN el que llevaba la información necesaria para que la cepa R fuera capaz de sintetizar una cápsula de polisacáridos idéntica a la queposeían las bacterias S.
Cuando Avery, MacLeod y McCarty publicaron sus resultados en 1944, fueron muy pocos los que concluyeron que los genes estaban compuestos de ADN. En esa época era realmente difícil de imaginar que una molécula “monótona” compuesta sólo de cuatro bases nitrogenadas diferentes pudiera tener la suficiente variabilidad como para llevar toda la información genética que precisabanlos seres vivos.
Llevó ocho años más para que la comunidad científica se convenciera de que el ADN era el material genético. Fue gracias al experimento que presentaron Al Hershey y Martha Chase en 1952, sobre la infección de bacteriófagos o fagos (virus que infectan bacterias). Los fagos están compuestos por una cabeza proteica que guarda en su interior ADN. Hershey y Chase vieron que durante lainfección el ADN abandona la cabeza del fago y entra en la bacteria, dejando afuera la cabeza proteica.

Experimento de Mc CartyEn 1944, Oswald Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty trataron de identificar el factor de transformación (FT), que debía encontrarse en los neumococos S muertos por el calor.
Para ello:
Trataron los neumococos S muertos por calentamiento con detergente para obtenerun lisado celular (un extracto libre de células que contenía el FT). Este lisado contiene (entre otras cosas) el polisacárido de la superficie celular, las proteínas, el ARN y el ADN de los neumococos S.
Sometieron al lisado a diversos tratamientos enzimáticos.
Inyectaron en ratones los neumococos de tipo R vivos junto con una fracción del lisado modificada enzimáticamente.
Y obtuvieron los...