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Páginas: 6 (1268 palabras) Publicado: 20 de octubre de 2011
El medio de cultivo LB (Luria Bertani) es el medio utilizado por excelencia para el mantenimiento de las cepas deE.coli recombinante en procesos de microbiología molecular.
Medio rico Luria–Bertani
A continuación se indica la composición del medio rico de cultivo de
Escherichia coli.

El medio rico líquido puede prepararse en botes Pyrex o en matraces
erlenmeyer para cultivos (10 ml demedio rico en matraz de 100 ml). El medio
sólido también se prepara en matraz de 100 ml, se deja enfriar un poco
4después de la esterilización (~63 ºC) y se reparte a razón de 25 ml por caja de
petri de 9 cm Ø. Por lo tanto, cada alumno preparará 10 ml de medio líquido y
25 ml de medio sólido.
Las cajas de medio rico, una vez haya solidificado el medio, se dejan boca
abajo en la estufa a37°C hasta el día siguiente (para secar el vapor
condensado). El secado puede realizarse rápidamente colocando las cajas
abiertas en una cabina estéril de flujo laminar durante una hora.
El medio rico líquido se almacena a temperatura ambiente. Las cajas de
medio rico se guardan en bolsas cerradas a 4°C hasta su uso. El medio rico
permanece estable durante meses.
Nota: No convieneañadir los agentes selectivos (en su caso) a las cajas con
medio sólido que vayan a ser conservadas en frigorífico. Es mejor prepararlas
sin dichos agentes (p.ej., antibióticos), y añadirlos en la superficie con un asa
de siembra triangular justo antes de usarse. Así se asegura que el antibiótico
no ha sido degradado.

* La lisozima, también llamada muramidasa, es una enzima de14,4 kilodalton que daña las células bacterianas catalizando la hidrólisis de las uniones beta 1,4 entre los residuos de ácido N-acetilmurámico y N-acetil-D-glucosamina en un peptidoglicano. La lisozima es abundante en numerosas secreciones como la saliva, las lágrimas y el moco. en donde actúa como una barrera frente a las infecciones. También es muy abundante en la clara del huevo, de donde se extrae parasu uso industrial, en particular para el control de las bacterias lácticas en los vinos. La lisozima fue descubierta por Fleming, el mismo que descubrió la penicilina. Además de encontrarse en la saliva y en las lágrimas, la lisozima está presente en el bazo, los pulmones, los leucocitos, el plasma, la leche y el cartílago.
 Las lisozimas sirven como opsoninas innatas uniéndose a la superficiebacteriana, reduciendo la carga negativa y facilitando la fagocitosis de las bacterias, todo esto antes de la llegada de las opsoninas del sistema inmunitario. En otras palabras, la lisozima hace que las células fagocíticas puedan absorber más fácilmente a la bacteria. Como enzima funciona atacando a los peptidoglicanos, lo que explica su localización en la pared celular de las bacterias,especialmente en las gram positivas. La lisozima hidroliza el enlace glucosídico entre el carbono 1(C1)del residuo de ácido N-acetilmurámico (NAM) y el carbono 4 (C4) de la N-acetilglucosamina (NAG).

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Tris
Se utiliza ampliamente enbioquímica y biología molecular,1 en particular para preparar disoluciones tampón (por ejemplo, tampones Tris-HCl,Tris-Gly, TAE y TBE). Es una amina primaria, con la reactividad típica, por ejemplo la condensación con aldehídos y el establecimiento de un equilibrio ácido-base (responsable de su capacidad tamponante). El intervalo útil de tamponamiento del Tris (7-9) coincide con el pH fisiológico de la mayoría de los seres vivos. Sumado a su bajo coste, esto hace del Tris uno de los tampones más comunes en laboratoriosde biología y bioquímica

EDTA:
El ácido etilendiaminotetraacético1 o EDTA, es una sustancia utilizada como agente quelante que puede crear complejos con un metal que tenga una estructura de coordinación octaédrica. se utilizan para precipitar metales pesados tóxicos de manera que puedan ser excretados por la orina. La fijación de plomo, cadmio, níquel por el EDTA, muestra una relación...
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