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REPLICACION
Los modelos para la réplica y la transcripción a menudo muestran polimerasas que rastrean como locomotoras a lo largo de sus plantillas de ADN. Sin embargo, pruebas recientes apoyan un modelo alternativo en el cual el ADN y polimerasas de ARN son inmovilizados por el accesorio a estructuras más grandes, donde ellos enrollan sus plantillas y sacan recién hecho nucleic ácidos. Estaspolimerasas no actúan por separado; ellos son concentrados en discreto Ò fábricas, Ó donde ellos trabajan juntos sobre muchas plantillas diferentes. Pruebas para el rastreo de implicación de modelos y polimerasas inmóviles son repasadas.
La idea que la pista de polimerasas como locomotoras a lo largo de sus plantillas penetra nuestro pensamiento; los modelos de manual para la réplica y latranscripción (1) muestran un complejo de polimerasas que ata a un origen o el promotor en el ADN, antes de marcharse como esto hace una cadena naciente (el Higo 1, un y B). Estos tallos de idea no de cualquier prueba experimental, pero de una percepción de tamaño relativo; el objeto más pequeño - la polimerasas - debería moverse. Sin embargo, ahora sabe que máquinas que polimerizan pueden ser enormes,achicando la plantilla (2-4). Repasaré pruebas para el rastreo y hablaré del modelo alternativo en el cual polimerasas fijas enrollan sus plantillas como ellos sacan recién hecho nucleic ácidos
Vario interrelacionó los factores hacen el análisis de acción de polimerasas difícil. La mayor parte de complejos de polimerasas son inactivos; por ejemplo, una bacteria que se divide rápidamente contiene;40 polimerasas de ADN pero sólo dos a seis tenedores de réplica (2). La población inactiva fácilmente es extraída, entonces los bioquímicos se han concentrado en ello (2-4). Sin embargo, la fracción activa fuerte es atada al ADN y a la subestructura (5); intenta liberarlo invariablemente rompen la plantilla, y los hilos de ADN rotos por lo general se hacen enredados en un gel insuperable. Porconsiguiente, las polimerasas a menudo son probadas en parachoques infisiológicos para reducir al mínimo la formación de tales geles, pero esto puede causar artefactos. Comienzo por hablando de polimerasas de ADN (como pruebas que ellos son inmovilizados es convincente), pero porque otras polimerasas tienen la homología extensa estructural, ellos probablemente trabajan de modo similar.
Porconsiguiente, las polimerasis a menudo son probadas en parachoques infisiológicos para reducir al mínimo la formación de tales geles, pero esto puede causar artefactos. Comienzo por hablando de polimerasis de ADN (como pruebas que ellos son inmovilizados es convincente), pero porque otras polimerasas tienen la homología extensa estructural, ellos probablemente trabajan de modo similar (6).
Polimerasas deADN inmóviles
En 1963, Jacob et al. (7) sugirió que las polimerasas de ADN pudieran ser conectadas a la membrana bacterial para facilitar el control de la iniciación de réplica y la distribución de plantillas duplicadas a células de hija. Ellos se imaginaron que el crecimiento específico de membrana entre dos cromosomas de progenie conectados aseguraría que los cromosomas segregado correctamente acélulas de hija. Ahora sabemos que un colega bacterial del huso eucariótico probablemente segrega los cromosomas.
Pero esta sugerencia incitó a bioquímicos a ver si las polimerasas y el ADN naciente fueran asociados con una subestructura celular. Las células fueron expuestas brevemente a un precursor de ADN etiquetado, derribados, y tratados con un nuclease para separar la mayor parte de ADN dela subestructura; etiquetado (recién hecho) el ADN permaneció atado a la subestructura - el tabique celular y la membrana en la bacteria (9) o remanentes nucleares como "matrices" " o núcleo jaulas " en eucariotas.
A pesar de estos resultados, pocos aceptaron la conclusión que las polimerasis de ADN fueron conectadas a una subestructura, principalmente para dos motivos. El ADN primer, naciente...