EXPOSICION BIOLOGIA DIAPOSITIVAS
Páginas: 4 (965 palabras)
Publicado: 28 de mayo de 2015
Aplicación de PCR-RFLP para
subtipificar Campylobacter jejuni
Este trabajo fue presentado en el XVII Congreso Latinoamericano de
Microbiología y X Congreso Argentino de Microbiología, realizado en laCiudad
Autónoma de Buenos Aires del 17 al 21 de octubre de 2004.
OBJETIVO
El objetivo de este trabajo fue aplicar una técnica de biología molecular accesible, con
la que se pudiera subtipificarlas especies de Campylobacter jejuni de origen porcino
obtenidas de diferentes establecimientos (cuatro), e identificadas previamente por
pruebas bioquímicas.
RESUMEN
Se utilizaron diezcepas de Campylobacter jejuni aisladas de fetos porcinos abortados
fueron identificadas por pruebas bioquímicas:
8 como C. jejuni biotipo II de Lior
2 como C. jejuni biotipo I
Para podersubtipificarlas se utilizó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa
(PCR) para amplificar el gen flaA.
El producto obtenido se lo digirió con la enzima de restricción DdeI (RFLP).
Se obtuvieron6 subtipos a partir de C. jejuni biotipo II
Los dos aislamientos de biotipo I correspondieron a un mismo subtipo
La biología molecular aporta una amplia variedad de técnicas parasubtipificar
genotípicamente a Campylobacter spp.
La técnica de PCR-RFLP para el gen flaA se basa en la amplificación del gen de la
flagelina por PCR, seguida por la digestión por enzimas de restricción quegeneren
fragmentos.
La diferencia en la distribución de los sitios de restricción en los genes fla entre las
cepas generará fragmentos de diferente tamaño y por lo tanto un modelo de bandadiferente, que se visualizará cuando se los separa por electroforesis.
METODOS
A 10 cepas aisladas de abortos
bioquímicamente como C. jejuni I de Lior:
porcinos
e
identificadas
(dos cepas,denominadas F3 y F4)
C. jejuni II de Lior:
(ocho cepas denominadas F1, F2, F5, F6, F8, F9, F10 y F11) (6) se les
extrajo el ADN por el método de fenol/cloroformo/isoamilalcohol y la
cuantificación...
subtipificar Campylobacter jejuni
Este trabajo fue presentado en el XVII Congreso Latinoamericano de
Microbiología y X Congreso Argentino de Microbiología, realizado en laCiudad
Autónoma de Buenos Aires del 17 al 21 de octubre de 2004.
OBJETIVO
El objetivo de este trabajo fue aplicar una técnica de biología molecular accesible, con
la que se pudiera subtipificarlas especies de Campylobacter jejuni de origen porcino
obtenidas de diferentes establecimientos (cuatro), e identificadas previamente por
pruebas bioquímicas.
RESUMEN
Se utilizaron diezcepas de Campylobacter jejuni aisladas de fetos porcinos abortados
fueron identificadas por pruebas bioquímicas:
8 como C. jejuni biotipo II de Lior
2 como C. jejuni biotipo I
Para podersubtipificarlas se utilizó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa
(PCR) para amplificar el gen flaA.
El producto obtenido se lo digirió con la enzima de restricción DdeI (RFLP).
Se obtuvieron6 subtipos a partir de C. jejuni biotipo II
Los dos aislamientos de biotipo I correspondieron a un mismo subtipo
La biología molecular aporta una amplia variedad de técnicas parasubtipificar
genotípicamente a Campylobacter spp.
La técnica de PCR-RFLP para el gen flaA se basa en la amplificación del gen de la
flagelina por PCR, seguida por la digestión por enzimas de restricción quegeneren
fragmentos.
La diferencia en la distribución de los sitios de restricción en los genes fla entre las
cepas generará fragmentos de diferente tamaño y por lo tanto un modelo de bandadiferente, que se visualizará cuando se los separa por electroforesis.
METODOS
A 10 cepas aisladas de abortos
bioquímicamente como C. jejuni I de Lior:
porcinos
e
identificadas
(dos cepas,denominadas F3 y F4)
C. jejuni II de Lior:
(ocho cepas denominadas F1, F2, F5, F6, F8, F9, F10 y F11) (6) se les
extrajo el ADN por el método de fenol/cloroformo/isoamilalcohol y la
cuantificación...
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