Expresión y producción a gran escala de Tejidos Humanos del activador del plasminógeno (tPA) en plantas transgénicas de tabaco utilizando diferentes péptidos señal
Páginas: 20 (4802 palabras)
Publicado: 22 de mayo de 2014
INTRODUCCIÓN
JUSTIFICACIÓN DE LA ELECCIÓN DE LA BIOMOLÉCULA
Los activadores del plasminógeno son enzimas que se utilizan comúnmente en el tratamiento de obstrucciones cardiovasculares y cerebrovasculares resultantes de ataques cardíacos y accidentes cerebrovasculares.
Dos activadores del plasminógeno fisiológicos han sido generalmente identificados: el activador de tipo tisular (t-PA) yel activador del plasminógeno de tipo uroquinasa (u-PA). El activador de plasminógeno de tejido de la enzima (t-PA) es una serina proteasa multi-dominio con 17 enlaces disulfuro, tres principal de
N-glicosilación y uno sitios de O-glicosilación, y un peso molecular de aproximadamente 68 kDa.
Es médicamente útil para la disolución de coágulos de sangre. La enzima es codificada por un gen de1681 pb y consta de cinco dominios distintos funcionales: un dominio de unión de dedo, un dominio de factor de crecimiento epidérmico, dos estructuras kringle, y un dominio catalítico (Conti, 2005).
Figura 1. Activador plasminógeno
Antecedentes de la producción de la biomolécula a nivel mundial
A mediados de la década de los 70’s para tratar la secuelas de las enfermedades, seestudiaba varias partes del mundo una proteína del organismo humano llamado activador del plasminógeno tisular (TPA). Disuelve los coágulos ya formados.
La empresa estadounidense Genetech aprovechó las investigaciones con el TPA humano para desarrollar un medicamento destinado inicialmente al tratamiento de infartos al corazón, y en 1987 lo sacó a la venta (Ganong, 2000).
Desde hace 20 años,la existencia de un numero único de características de las plantas basados en los sistemas de expresión ha dado lugar a lograr la atención de científicos para desarrollar plantas transgénicas en todo el mundo con respecto a la producción a gran escala de las enzimas industriales y proteínas farmacéuticas.
Las plantas transgénicas (debido a sus características notables, incluyendo la rápidaescalabilidad, la capacidad de plegar correctamente y montar proteínas complejas de proceso; el potencial para la administración oral directa de material vegetal sin transformar o parcialmente procesados; hay riesgo de contaminación con patógenos humanos ,viabilidad ampliar , y la capacidad para llevar a cabo las modificaciones post-traduccionales adecuadas, glicosilación precisa, que desempeña unpapel fundamental para la actividad biológica y la estabilidad de las proteínas terapéuticas humanas) en consecuencia han mostrado un gran potencial para ofrecer un seguro, eficiente y costo - efectiva significa en la fabricación de una gran cantidad de proteínas farmacéuticas recombinantes en todo el mundo ,sorprendentemente de una manera rentable (Conti, 2005).
Aunque un número de sistemas dehuésped de la planta se han propuesto como biorreactores fiables a producir proteínas heterólogas, entre los cuales, la planta del tabaco (Nicotiana tabacum L.) se ha demostrado históricamente como la más establecida en ceder la proteína recombinantes (Hojjat et al., 2013).
La planta, de hecho, tiene un rendimiento de biomasa alta (más de 100 000 kg por ha), y la plataforma se basa en las hojas, loque elimina la necesidad de la floración y de este modo minimizar la contingencia de escape de genes en el medio ambiente a través del polen o dispersión de semillas. Del mismo modo, en vista del hecho de que el tabaco es un cultivo no alimentaria y no de alimentación, no es en consecuencia poco riesgo de material transgénico contaminar la cadena alimentaria.
Hoy en día, un sistema de cultivode células de mamífero tales como células CHO todavía se utiliza para la producción de t-PA para fines comerciales, mientras que E. coli se utiliza para fines clínicos. Tales procedimientos populares, sin embargo, son muy costosos; los costos totales de producción se han medido a ser más de 2.000 dólares EE.UU. por dosis (100 mg). Para poner remedio a tales limitaciones considerables , más...
JUSTIFICACIÓN DE LA ELECCIÓN DE LA BIOMOLÉCULA
Los activadores del plasminógeno son enzimas que se utilizan comúnmente en el tratamiento de obstrucciones cardiovasculares y cerebrovasculares resultantes de ataques cardíacos y accidentes cerebrovasculares.
Dos activadores del plasminógeno fisiológicos han sido generalmente identificados: el activador de tipo tisular (t-PA) yel activador del plasminógeno de tipo uroquinasa (u-PA). El activador de plasminógeno de tejido de la enzima (t-PA) es una serina proteasa multi-dominio con 17 enlaces disulfuro, tres principal de
N-glicosilación y uno sitios de O-glicosilación, y un peso molecular de aproximadamente 68 kDa.
Es médicamente útil para la disolución de coágulos de sangre. La enzima es codificada por un gen de1681 pb y consta de cinco dominios distintos funcionales: un dominio de unión de dedo, un dominio de factor de crecimiento epidérmico, dos estructuras kringle, y un dominio catalítico (Conti, 2005).
Figura 1. Activador plasminógeno
Antecedentes de la producción de la biomolécula a nivel mundial
A mediados de la década de los 70’s para tratar la secuelas de las enfermedades, seestudiaba varias partes del mundo una proteína del organismo humano llamado activador del plasminógeno tisular (TPA). Disuelve los coágulos ya formados.
La empresa estadounidense Genetech aprovechó las investigaciones con el TPA humano para desarrollar un medicamento destinado inicialmente al tratamiento de infartos al corazón, y en 1987 lo sacó a la venta (Ganong, 2000).
Desde hace 20 años,la existencia de un numero único de características de las plantas basados en los sistemas de expresión ha dado lugar a lograr la atención de científicos para desarrollar plantas transgénicas en todo el mundo con respecto a la producción a gran escala de las enzimas industriales y proteínas farmacéuticas.
Las plantas transgénicas (debido a sus características notables, incluyendo la rápidaescalabilidad, la capacidad de plegar correctamente y montar proteínas complejas de proceso; el potencial para la administración oral directa de material vegetal sin transformar o parcialmente procesados; hay riesgo de contaminación con patógenos humanos ,viabilidad ampliar , y la capacidad para llevar a cabo las modificaciones post-traduccionales adecuadas, glicosilación precisa, que desempeña unpapel fundamental para la actividad biológica y la estabilidad de las proteínas terapéuticas humanas) en consecuencia han mostrado un gran potencial para ofrecer un seguro, eficiente y costo - efectiva significa en la fabricación de una gran cantidad de proteínas farmacéuticas recombinantes en todo el mundo ,sorprendentemente de una manera rentable (Conti, 2005).
Aunque un número de sistemas dehuésped de la planta se han propuesto como biorreactores fiables a producir proteínas heterólogas, entre los cuales, la planta del tabaco (Nicotiana tabacum L.) se ha demostrado históricamente como la más establecida en ceder la proteína recombinantes (Hojjat et al., 2013).
La planta, de hecho, tiene un rendimiento de biomasa alta (más de 100 000 kg por ha), y la plataforma se basa en las hojas, loque elimina la necesidad de la floración y de este modo minimizar la contingencia de escape de genes en el medio ambiente a través del polen o dispersión de semillas. Del mismo modo, en vista del hecho de que el tabaco es un cultivo no alimentaria y no de alimentación, no es en consecuencia poco riesgo de material transgénico contaminar la cadena alimentaria.
Hoy en día, un sistema de cultivode células de mamífero tales como células CHO todavía se utiliza para la producción de t-PA para fines comerciales, mientras que E. coli se utiliza para fines clínicos. Tales procedimientos populares, sin embargo, son muy costosos; los costos totales de producción se han medido a ser más de 2.000 dólares EE.UU. por dosis (100 mg). Para poner remedio a tales limitaciones considerables , más...
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