extendido sanguineo
Obtención de la muestra y preparación del extendido de sangre periférica:
Casi todas la muestras para hematología, se recolecta en tubo de tapa lila que contiene EDTA (que anti coagula la sangre por quelacion del calcio)
Los extendidos deben realizarse dentro de 2 a 3 horas de la toma de la muestra
El EDTA impide la aglutinación de las plaquetas en el portaobjeto.Preparación del extendido de sangre periférica:
La sangre de ciertos pacientes sufren satelitosis plaquetaria cuando se aglutina con EDTA (las plaquetas rodean al neutrofilo)
Debe tomarse la muestra en un tubo con citrato de sodio al 3,8%
Los leucocitos y plaquetas se multiplican por 1.1para obtener resultados exactos
Punción talón, dedo- extendido inmediato
Tipos de extendidos:
Manualcon 2 portaobjetos en ángulo
2 portaobjeto de vidrio de 75x25mm limpio, bordes biselados y esquinas romas
También puede hacerse con un cubre objeto de hemocitómetro
Técnicas de extendidos sanguíneos:
Se coloca una gota de sangre de 2 a 3 mm de diámetro en el extremo del portaobjeto
El tamaño de la gota es muy importante, demasiado grueso, extendido muy largo o muy grueso; demasiadopequeña, extendido corto o delgado
El portaobjeto extensor se sostiene con firmeza con la mano dominante a un ángulo de 30 a 45 grados, se lleva hasta atrás hasta tocar la gota de sangre, dejando que se esparza por todo lo ancho del portaobjeto
Entonces se empuja con rapidez y suavidad hacia delante, hasta el final del portaobjeto.
Toda la gota debe incluirse en el extendido
Movimiento lentoproduce mala distribución de los leucocitos, porque desplaza la célula mas grande hacia el final y los lados del extendido
El Hto ángulos de 25 grados
El Hto bajos aumentar el ángulo
Características de extendido bien preparado
Debe cubrir de dos tercios a tres cuartas partes de la longitud del extendido
Tiene forma de dedo, ligeramente redondeado en el borde mas fino
Los bordeslaterales deben ser visible
Extendido parejo, sin agujeros ni estrías
Toda la gota debe ser incluida y extendida
Al colocar contra la luz la porción delgada debe tener aspecto en arco iris
Preparación y tinción automatizada de extendidos
Después que el equipo analizo una muestra, el portador desplaza el tubo y lee el código de barra
De acuerdo con el Hto el sistema ajusta el tamaño de la gota ausar, y el ángulo y la velocidad del portaobjeto extensor
Luego de preparar el extendido, el portaobjeto extensor se limpia en forma automática
Tinción automática de extendido
El nombre, numero y fecha de la muestra se imprime en el portaobjeto
Luego se seca, se carga el cassette y se va al sitio de tinción, cuando la tinción esta terminada, el portaobjeto se desplaza a un sitio de secado,luego a una zona de almacenamiento, para ser leído
Deben secarse tan rápido como sea posible
Tinción de lo extendido de sangre periférica
Wright o wrihgt-giemsa (ramanowsky)
Estas coloraciones son policromaticas pues tiene eosina y azul de metileno
El metanol fija las células al portaobjetos
El azul de metileno oxidado y la eosina, tiñen los componentes neutros
El buffer que se agrega ala tinción debe ser fosfato de sodio 0,05 o agua destilada
El azul de metileno tiñe los componentes celulares ácidos (basofilos) como el ARN
La eosina libre es acida y tiñe los componentes básicos (eosinofilos) la Hb, los granulos eosinofilos.
Los neutrofilos se denominan asi xq tienen gránulos citoplasmáticos con pH neutro y toman algunas características de tinción de ambas coloraciones
Losportaobjetos tienen que secarse antes de teñirlos
Métodos de coloración de Wright
Se realiza sobre un soporte para coloraciones
Puede filtrarse antes de usarlo en forma directa desde la botella
Es importante cubrir el portaobjeto por completo
El colorante debe permanecer sobre el portaobjeto de 1 a 3 minutos
Luego se pone una cantidad igual de buffer al portaobjeto
Si la mezcla es...
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