Extracción De Bromelina
Páginas: 6 (1388 palabras)
Publicado: 19 de noviembre de 2012
EXTRACCION DE BROMELINA A PARTIR DE RESIDUOS DE LA PIÑA
OBJETIVO GENERAL.
Evaluar la extracción de bromelina para fines industriales o tratamientos biomédicos a partir de residuos de piña.
OBJETIVOS ESPECIFICOS.
• Cuantificar la cantidad de concentración de proteínas.
• Determinar la actividad enzimática de la Bromelina según las diferentes partes de este fruto.JUSTIFICACION.
La piña es un fruto tropical la cual tiene actividad proteolítica debido a la bromelina interesantes por su aplicaciones alimentarias y terapéuticas ,la principal ventaja de esta proteasa frente a otras como la papaína o la ficina es que se extrae fácilmente a partir de los residuos tanto de plantaciones como de las fabricas de enlatados de piña pudiéndose de este modo aprovecharresiduos de industrias o de procesos industriales para extracción y purificación de esta enzima a un menor costo si la actividad enzimática y la concentración de la proteína no es menor que si se obtuviera de el fruto.
La extracción de la cascara o residuos de la piña disminuiría costos en la extracción y purificación de la enzima para tratamientos biomédicos como se demostró la posibleactividad antitumoral de cisteino-proteasas como esta enzima contenida en la piña y en la industria alimentaria.
MARCO TEORICO
Las proteasas son enzimas que catalizan la hidrólisis de enlaces peptídicos en las proteínas, se agrupan según los residuos de aminoácidos, del centro activo y los mecanismos de acción, dentro de las cisteíno peptidasas (EC 3.4.22) se encuentra a la papaína y bromelina (1).La piña es una fruta tropical de la familia de las bromeliacea, es rica en vitaminas A, B, C y tiene actividad proteolítica debida a la bromelina que se activa por la cisteína, tiosulfato y glutatión. Es inhibida o inactivada por iones metálicos oxidantes y por agentes que reaccionan con los tioles (ácido ascórbico). La bromelina de los frutos es una proteasa ácida, su intensa actividadproteolítica no se modifica en zonas de pH entre 3 y 8. Es una proteína constituida por aminoácidos que se encuentran enrollados en dos partes separadas por un puente que tiene un lugar activo con un grupo tiol (SH) libre.
Esta biomolécula se utiliza como ablandadora de carnes (1), complemento alimenticio y se ha descrito que muestran varias acciones farmacológicas por ejemplo aumentan la absorción demedicamentos (2) se han utilizado en tratamientos de desórdenes digestivos, en enfermedades virales y en la formulación de vacunas. Tienen potencialidades como antiedematosas, antiinflamatorias, antitrombóticas y fibrinolíticas. Recientemente, se demostró la posible actividad antitumoral de cisteíno-proteasas como la bromelina contenida en la piña en 5 tumores transplantables de ratón: Leucemia p-388,carcinoma pulmonar de Lewis, adenocarcinoma-755, sarcoma-37 y tumor ascitico de Ehrlinch (3), así como la inhibición en la proliferación de tumores cerebrales (4). El objetivo del presente trabajo fue evaluar la obtención de bromelina a partir de cáscara, corazón y pulpa de la piña.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se partió de una piña previamente lavada y fraccionada en pulpa cáscara y corazón. Estasfracciones fueron molidas por separado en un extractor de jugos, el volumen resultante se multiplicó por 1,5 y esa fue la cantidad añadida de etanol. Las mezclas extracto-etanol fueron distribuidas en tubos falcón de 50 mL y colocados a -10 °C durante 7 días, a continuación las muestras fueron centrifugadas a 8 500 rev/min durante 10 min. El sobrenadante fue eliminado y las pastillas de cada muestrafueron recolectadas en un volumen final de 1 mL de solución tampón Tris-HCl 50 mM pH 8.
Para la cuantificación de proteínas se utilizo el método de Lowry cuya sensibilidad es de 1 a 2 µg, el cual se realizó de la siguiente manera: a 300 µL de muestra o estándar se le adicionaron 300 µL de solución de hidróxido de sodio 2N y se colocó a 100 ºC durante 10 min. Después se dejó enfriar la mezcla a...
OBJETIVO GENERAL.
Evaluar la extracción de bromelina para fines industriales o tratamientos biomédicos a partir de residuos de piña.
OBJETIVOS ESPECIFICOS.
• Cuantificar la cantidad de concentración de proteínas.
• Determinar la actividad enzimática de la Bromelina según las diferentes partes de este fruto.JUSTIFICACION.
La piña es un fruto tropical la cual tiene actividad proteolítica debido a la bromelina interesantes por su aplicaciones alimentarias y terapéuticas ,la principal ventaja de esta proteasa frente a otras como la papaína o la ficina es que se extrae fácilmente a partir de los residuos tanto de plantaciones como de las fabricas de enlatados de piña pudiéndose de este modo aprovecharresiduos de industrias o de procesos industriales para extracción y purificación de esta enzima a un menor costo si la actividad enzimática y la concentración de la proteína no es menor que si se obtuviera de el fruto.
La extracción de la cascara o residuos de la piña disminuiría costos en la extracción y purificación de la enzima para tratamientos biomédicos como se demostró la posibleactividad antitumoral de cisteino-proteasas como esta enzima contenida en la piña y en la industria alimentaria.
MARCO TEORICO
Las proteasas son enzimas que catalizan la hidrólisis de enlaces peptídicos en las proteínas, se agrupan según los residuos de aminoácidos, del centro activo y los mecanismos de acción, dentro de las cisteíno peptidasas (EC 3.4.22) se encuentra a la papaína y bromelina (1).La piña es una fruta tropical de la familia de las bromeliacea, es rica en vitaminas A, B, C y tiene actividad proteolítica debida a la bromelina que se activa por la cisteína, tiosulfato y glutatión. Es inhibida o inactivada por iones metálicos oxidantes y por agentes que reaccionan con los tioles (ácido ascórbico). La bromelina de los frutos es una proteasa ácida, su intensa actividadproteolítica no se modifica en zonas de pH entre 3 y 8. Es una proteína constituida por aminoácidos que se encuentran enrollados en dos partes separadas por un puente que tiene un lugar activo con un grupo tiol (SH) libre.
Esta biomolécula se utiliza como ablandadora de carnes (1), complemento alimenticio y se ha descrito que muestran varias acciones farmacológicas por ejemplo aumentan la absorción demedicamentos (2) se han utilizado en tratamientos de desórdenes digestivos, en enfermedades virales y en la formulación de vacunas. Tienen potencialidades como antiedematosas, antiinflamatorias, antitrombóticas y fibrinolíticas. Recientemente, se demostró la posible actividad antitumoral de cisteíno-proteasas como la bromelina contenida en la piña en 5 tumores transplantables de ratón: Leucemia p-388,carcinoma pulmonar de Lewis, adenocarcinoma-755, sarcoma-37 y tumor ascitico de Ehrlinch (3), así como la inhibición en la proliferación de tumores cerebrales (4). El objetivo del presente trabajo fue evaluar la obtención de bromelina a partir de cáscara, corazón y pulpa de la piña.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se partió de una piña previamente lavada y fraccionada en pulpa cáscara y corazón. Estasfracciones fueron molidas por separado en un extractor de jugos, el volumen resultante se multiplicó por 1,5 y esa fue la cantidad añadida de etanol. Las mezclas extracto-etanol fueron distribuidas en tubos falcón de 50 mL y colocados a -10 °C durante 7 días, a continuación las muestras fueron centrifugadas a 8 500 rev/min durante 10 min. El sobrenadante fue eliminado y las pastillas de cada muestrafueron recolectadas en un volumen final de 1 mL de solución tampón Tris-HCl 50 mM pH 8.
Para la cuantificación de proteínas se utilizo el método de Lowry cuya sensibilidad es de 1 a 2 µg, el cual se realizó de la siguiente manera: a 300 µL de muestra o estándar se le adicionaron 300 µL de solución de hidróxido de sodio 2N y se colocó a 100 ºC durante 10 min. Después se dejó enfriar la mezcla a...
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