Extraccion ADN

Extracción casera de ADN

Para la extracción ADN existen unas etapas para poder logar el objetivo, estas son:

1. En primer lugar se debe romper la pared celular y la membrana
plasmática parapoder acceder al núcleo de la célula.

2. Segundo, debemos romper igual la membrana nuclear para dejar libre el ADN.

3. Por último, debemos proteger el ADN de enzimas que puedan disminuirlo ypara aislarlo se debe meter en un recipiente con alcohol.


Materiales:

Muestra vegetal (ya sea tomate, cebolla)
Agua destilada
Sal de mesa
Detergente liquido
Alcohol
Licuadora
NeveraColador
Tubo de ensayo
Pinzas

Procedimiento:

1. Preparar un tampón mezclado con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado:
120 ml de agua,
1,5 g de salde mesa
5 g de bicarbonato
5 ml de detergente líquido

2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN, ya sea cebolla o tomate



3. Triturar la muestra agregándole un poco de agua en lalicuadora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Y así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.

4. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml deltriturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo másfino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.


5. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcoholisoamílico enfriado a 0ºC. Se tiene que dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol va a quedar flotando sobre el tampón.


6. Seintroduce la punta de una pinza estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos...