Extraccion De Acidos Nucleicos
Páginas: 5 (1114 palabras)
Publicado: 22 de octubre de 2012
EXTRACCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS
Liseth Rodríguez Pinto
Licenciatura en Biología y Química VII semestre
Universidad del Atlántico
Km 7 Vía Puerto Colombia
22/10/2012
RESUMEN
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula, se debe de romper también lamembrana nuclear para dejar libre el ADN. Por ultimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. La solución de detergente y sal ayuda por la acción de la licuadora a romper la pared celular y la membrana plasmática y nuclear.
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PALABRAS CLAVES: extracción, ADN, membrana plasmática,pared celular, enzimas.
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INTRODUCCION
Los ácidos nucleicos son biomoléculas orgánicas presentes todas las células. Éstas están formadas por macropolímeros de nucleótidos (polímeros cuyos monómeros son nucleótidos) o polinucleótidos, compuestas por carbono, hidrogeno, oxigeno y fosforo, y sus monómeros están constituidas por base nitrogenadas(púricas y pirimídicas), azúcar (en el caso del ARN el azúcar es la ribosa, mientras que en el ADN el azúcar es la desoxirribosa). Los nucleótidos se mantienen unidos mediante enlaces covalentes, denominados fosfodiéster entre el azúcar de un acido nucleótido, y el ácido fosfórico de otro.
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-------------------------------------------------OBJETIVOS
* Realizar la extracción de ADN de tejidos vegetales y analizar su composición mediante de esta técnica sencilla.
* Observar la estructura fibrilar del ADN.
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Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades químico-físicas del ADN
MATERIALES
Muestra vegetal, en este caso la cebolla
- Agua(destilada o mineral)
- Sal de mesa
- Bicarbonato sódico
- Detergente líquido o champú
- Alcohol isoamílico a 0°C
- Batidora
- Nevera
- Colador o centrífuga
- Vaso
- Tubo de ensayo
- Varilla fina
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METODOLOGIA
Preparar una mezcla (1) con los siguientes ingredientes y mantenerlo en la nevera
* 120 ml de agua, si es posible destiladay si no mineral. No usar agua del grifo.
* 1,5 g de sal de cocina, preferiblemente pura.
* 5 g de bicarbonato sódico.
* 5 ml de detergente o champú, el detergente tiene que ser liquido
Se corta la cebolla en cuadritos, luego se tritura con un poco de agua en la licuadora, después que se hayan rotos muchas células, se mezcla en un recipiente limpio 5 ml de la mezcla (2) con 10 mlcon la mezcla (1) que se hizo al comienzo y agitar durante 2 minutos mínimo, luego se separan los restos mas grandes del caldo molecular dejando pasar las partículas mas finas posibles, después se retiran 5 ml de este caldo y se echan en un tubo de ensayo y con la ayuda de una pipeta agregar 10 ml de alcohol isoamilico enfriado a 0°, el alcohol se debe de dejar caer por la cara interna del tubo deensayo, el alcohol va a quedar flotando sobre la mezcla. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y la mezcla. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a suextremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.
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CUESTIONARIO
1. ¿Qué función tiene el detergente líquido?
La función que tiene el detergente líquido en esta practica es que el ayuda a deshacer las membranas para dejar el ADN
2. ¿Qué función tiene el alcohol isoamilico?
La función que cumple el alcohol isoamilico es que...
Liseth Rodríguez Pinto
Licenciatura en Biología y Química VII semestre
Universidad del Atlántico
Km 7 Vía Puerto Colombia
22/10/2012
RESUMEN
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula, se debe de romper también lamembrana nuclear para dejar libre el ADN. Por ultimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. La solución de detergente y sal ayuda por la acción de la licuadora a romper la pared celular y la membrana plasmática y nuclear.
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PALABRAS CLAVES: extracción, ADN, membrana plasmática,pared celular, enzimas.
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INTRODUCCION
Los ácidos nucleicos son biomoléculas orgánicas presentes todas las células. Éstas están formadas por macropolímeros de nucleótidos (polímeros cuyos monómeros son nucleótidos) o polinucleótidos, compuestas por carbono, hidrogeno, oxigeno y fosforo, y sus monómeros están constituidas por base nitrogenadas(púricas y pirimídicas), azúcar (en el caso del ARN el azúcar es la ribosa, mientras que en el ADN el azúcar es la desoxirribosa). Los nucleótidos se mantienen unidos mediante enlaces covalentes, denominados fosfodiéster entre el azúcar de un acido nucleótido, y el ácido fosfórico de otro.
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-------------------------------------------------OBJETIVOS
* Realizar la extracción de ADN de tejidos vegetales y analizar su composición mediante de esta técnica sencilla.
* Observar la estructura fibrilar del ADN.
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Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades químico-físicas del ADN
MATERIALES
Muestra vegetal, en este caso la cebolla
- Agua(destilada o mineral)
- Sal de mesa
- Bicarbonato sódico
- Detergente líquido o champú
- Alcohol isoamílico a 0°C
- Batidora
- Nevera
- Colador o centrífuga
- Vaso
- Tubo de ensayo
- Varilla fina
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METODOLOGIA
Preparar una mezcla (1) con los siguientes ingredientes y mantenerlo en la nevera
* 120 ml de agua, si es posible destiladay si no mineral. No usar agua del grifo.
* 1,5 g de sal de cocina, preferiblemente pura.
* 5 g de bicarbonato sódico.
* 5 ml de detergente o champú, el detergente tiene que ser liquido
Se corta la cebolla en cuadritos, luego se tritura con un poco de agua en la licuadora, después que se hayan rotos muchas células, se mezcla en un recipiente limpio 5 ml de la mezcla (2) con 10 mlcon la mezcla (1) que se hizo al comienzo y agitar durante 2 minutos mínimo, luego se separan los restos mas grandes del caldo molecular dejando pasar las partículas mas finas posibles, después se retiran 5 ml de este caldo y se echan en un tubo de ensayo y con la ayuda de una pipeta agregar 10 ml de alcohol isoamilico enfriado a 0°, el alcohol se debe de dejar caer por la cara interna del tubo deensayo, el alcohol va a quedar flotando sobre la mezcla. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y la mezcla. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a suextremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.
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CUESTIONARIO
1. ¿Qué función tiene el detergente líquido?
La función que tiene el detergente líquido en esta practica es que el ayuda a deshacer las membranas para dejar el ADN
2. ¿Qué función tiene el alcohol isoamilico?
La función que cumple el alcohol isoamilico es que...
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