EXTRACCION DE ADN EN PLANTAS

EXTRACCION DE ADN EN PLANTAS
OBJETIVOS
Conocer por medio de un experimento como se realiza la extracción de ADN en plantas
Aprender a hacer la extracción de ADN con la ayuda de un experimento para un laboratorio

CONOCIMIENTOS PREVIOS
La extracción de ADN consta de una etapa de lisis, que consiste en romper las estructuras que confinan el citoplasma y liberar al medio su contenido y otra depurificación, que implica la retirada de la solución final de la mayoría de elementos que pueden interferir en la PCR, De los tres pasos críticos que componen el aná- lisis de patógenos por PCR, la extracción de ADN es quizás el más desconocido y sobre el que más control podemos ejercer. La extracción del ADN de las células o virus donde se halla confinado es un paso previo en muchos procedimientosanalíticos y diagnósticos.
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas
En primer lugar tienen que romperse la membrana plasmática de la célula eucariota para poder acceder al núcleo de la célula. En el caso de los vegetales también habrá que romper la pared celular.
A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN.
Por último hay que proteger el ADN deenzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.
Como el ADN se encuentra en todas las células de los seres vivos, incluyendo por supuesto los vegetales, intentaremos extraer esta importante molécula a partir de cualquier fruta.
El proceso de extracción de ADN desde una célula es el primer paso para muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios debiotecnología.
Los científicos deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas que se encuentran en las células, evitando que el ADN se desnature (que se rompa).
El material que se necesita para ello es fácil de encontrar y el procedimiento es sencillo .Cada uno de los ingredientes tiene su propia función . la solución de sal y jabón sirve para romper la membrana plasmática ynuclear e incluso la pared celular.El líquido de lentillas elimina las proteinas que degradan el ADN. El alcohol etílico sirve para precipitar el ADN

EL ADN
El ADN constituye el material hereditario de un individuo. En él están escritas las instrucciones que deben seguir las células para construir un organismo y mantenerlo vivo. Todas las células que forman un individuo contienen una copiaidéntica de ADN. Cada una de ellas, sin embargo, lee una parte de estas instrucciones y por eso hay células con diferentes formas y funciones.
Está formado por desoxirribonucleotidos (A,G,C,T). Que a su vez están formados por un azúcar desoxirribosa y un ion fosfato.
REACTIVOS
Disolución de homogenización o solución salina al 0,9% de NaCl, mantener a 4ºC:
Agua desionizada 150mL
NaCl 1,5g
NaHCO3bicarbonato de sódio 5g
Disolución de lisis o Buffer de lisis mantener a 4ºC:
Agua desionizada 250mL
NaCl 1,5g
NaHCO3 bicarbonato de sódio 5g
SDS dodecilsulfato sódico 5mL
Proteinasa K 10mg/mL (zumo de piña)
Alcohol enfriado mantener a 0ºC
Etanol 70% 150mL de
Azul de metileno, colorante básico
MATERIALES
Tubos de ensayo
Vasos de precipitado
Probeta
Varilla de vidrio
Portaobjetos
CubreobjetosEmbudo para filtrar
Mano de mortero
Tubos de ensayo para centrífuga
Pipetas Pasteur
Papel de filtro
Gradilla para tubos
Colador metálico
Tijeras
Pinzas
PREGUNTA PROBLEMA
Porque es importante la extracción de ADN?
La extracción de ADN es un procedimiento importante de la biología molecular. Por definición, es extraer ADN de cualquier tipo de célula con el propósito de analizarla. Entre las máquinasutilizadas para extraer el ADN están las "Batidoras", las cuales rompen las células para acceder al ADN, el "Frasco de gel", el cual separa las secuencias de ADN en un gel usando una carga eléctrica, y la centrifugación, la cual hace girar una solución de ADN y luego lo precipita (extrayéndolo) utilizando sales. Una vez que se extrae el ADN, su importancia se usa para numerosas funciones.
MARCO...