EXTRACCION DE ADN

1._ ¿Cual es la actividad lítica del PVP o Polivinilpirrol?
PVP (polivinil pirrolidona) Detergente Elimina compuestos fenólicos que pueden
inhibir la actividad de enzimas.
2.- Explique elprocedimiento de lisis celular en células vegetales
El objetivo principal en un experimento de extracción de ADN es obtener una preparación de buena calidad y en gran cantidad. La calidad se refierea la posibilidad de almacenar el ADN por tiempo indefinido, manteniendo su estructura y propiedades y es la calidad del ADN el factor responsable de la reproduciblidad en experimentos posteriores. Lacantidad, por su parte, es un concepto relativo que depende, entre otros, del número y estado de las células propias del tejido a estudiar. Por lo tanto, como regla general, un buen método deextracción debe mantener la integridad física y bioquímica del ADN e incrementar sus rangos de pureza y concentración.
Ruptura de tejidos y paredes celulares. Este paso consiste en pulverizar elmaterial vegetal a bajas temperaturas, generalmente empleando nitrógeno líquido o hielo seco También existe la pulverización en seco, un proceso en el cual los tejidos se deshidratan por secado en un hornoo con silicagel. Sin embargo, este procedimiento no es de aplicación general y en palma de aceite, por ejemplo, el tratamiento de secado no permite recuperar ADN de buena calidad. Para degradarparedes celulares se pueden utilizar, además, enzimas tipo celulasas
Ruptura de membranas. Una vez el tejido es disgregado en células, se hace necesario romper las membranas celulares para liberar elADN.
Esto puede ser llevado a cabo químicamente con detergentes (SDS, Triton o detergentes comerciales). También se emplean métodos físicos, como aquellos basados en ultrasonido
3.- Describir lasfuentes de ADN de las células vegetales, y el tipo de ADN que se obtiene
El ADN que ha sido extraído de un tejido debe ser cuantificado y su calidad verificada. El método más empleado para la...