Extraccion De Adn

INTRODUCCIÓN
El aislamiento del ADN es el principio de muchos métodos usados en la ingeniería genética, como la transformación, secuenciación, mapeo físico, mutagenesis sitio dirigidas, etc. Elaislamiento de los ácidos nucleicos implica la destrucción de la célula por choque osmótico, homogeneización, digestión enzimática o tratamiento mecánico suave.
OBJETIVO
Aislar y observar el ADNextraído de forma rudimentaria.

MATERIALES
• Microscopio
• Cubreobjetos
• Portaobjetos
• Pipetas de 5 y 10 ml
• Propipeta
• Tubos de ensayo
• Gotarios
• Varilla de vidrio o palillos
• Morterocon pistilo
• Vasos de precipitado
• Arena lavada
• Trozos de tela para filtrar o gasa
• Hielo
• Parafilm en cuadritos
MATERIAL BIOLOGICO
• Trozos de hígado
• Material vegetal ( Espinaca)REACTIVOS
• Agua destilada
• Alcohol de 96º
• Cloruro sódico 2M
• Detergente liquido o shampoo
• Azul de metileno

PROCEDIMIENTO
1. Triturar un fragmento pequeño de hígado o material vegetal(previamente cortado en trozos) en un mortero. Añadir arena para que al triturar se puedan romper las membranas y se liberen los núcleos sueltos.

2. Añadir al triturado, 50 ml de agua destilada.Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.

3. Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper.

4. Mezclar en un tubo de ensayo 4 ml deltriturado con un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos producir el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina.

5. A continuación se añade 1 ml dedetergente líquido. Así nos quedara el ADN libre de las proteínas que tiene asociadas.

6. Cubrir el tubo con Parafilm mezclar por inversión.

7. Tomar 5 ml del preparado a un tubo de ensayo yañadir con pipeta 5 ml de alcohol de 96º mantenido en hielo .Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del tubo y se formen dos capas, teniendo este inclinado. En la interface,...