extraccion de ADN
Páginas: 2 (288 palabras)
Publicado: 22 de abril de 2014
EXTRACCIÓN DEL ADN VEGETAL
OBJETIVOS
Extraer ADN en muestras de tejidos vegetales.
MATERIALES
Cebolla o espinaca o tomate 200 gr.
Varilla de vidrio.
Alcohol de 96°
Clorurosódico 2M
SDS El dodecilsulfato sódico ( cualquier detergente concentrado)
Pedazos de gasa para filtrar.
Vasos precipitados de 200 ml o 500 ml.
Probeta.
Embudo.
Mortero y pilón.PROCEDIMIENTOS
1. Triturar 300 gr de tejido vegetal o cortar en trozos con ayuda del cuchillo. (puedes utilizar el mortero)
2. Añadir al triturado, 100 centímetros cúbicos de aguadestilada. Remover hasta hacer una especie de papilla o puré añadir media cucharadita de sal
3. Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado porromper.
4. Medir el volumen del filtrado con una probeta.
5. A continuación se añade 1/6 centímetro cúbico de SDS del volumen filtrado. (Nota: Si no se dispone de este producto puedesustituirse por un detergente de vajillas) La acción de este detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos quedará el ADN libre de las proteínas que tieneasociadas.
6. Dejar reposar 10 minutos.
7. Pasarlo a un vaso precipitado.
8. Agregar zumo de piña de papaya una pizca mover.
9. Añadir mediante una pipeta las 2/3 partes de volumenformado con alcohol de 96° el alcohol debe de estar frio. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita elADN.
10. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado dela agrupación de muchas fibras de ADN.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué dificultades se presentaron para la realización de la práctica?
2. ¿Por qué se le agrega zumo de papaya o piña?
OBJETIVOS
Extraer ADN en muestras de tejidos vegetales.
MATERIALES
Cebolla o espinaca o tomate 200 gr.
Varilla de vidrio.
Alcohol de 96°
Clorurosódico 2M
SDS El dodecilsulfato sódico ( cualquier detergente concentrado)
Pedazos de gasa para filtrar.
Vasos precipitados de 200 ml o 500 ml.
Probeta.
Embudo.
Mortero y pilón.PROCEDIMIENTOS
1. Triturar 300 gr de tejido vegetal o cortar en trozos con ayuda del cuchillo. (puedes utilizar el mortero)
2. Añadir al triturado, 100 centímetros cúbicos de aguadestilada. Remover hasta hacer una especie de papilla o puré añadir media cucharadita de sal
3. Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado porromper.
4. Medir el volumen del filtrado con una probeta.
5. A continuación se añade 1/6 centímetro cúbico de SDS del volumen filtrado. (Nota: Si no se dispone de este producto puedesustituirse por un detergente de vajillas) La acción de este detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos quedará el ADN libre de las proteínas que tieneasociadas.
6. Dejar reposar 10 minutos.
7. Pasarlo a un vaso precipitado.
8. Agregar zumo de piña de papaya una pizca mover.
9. Añadir mediante una pipeta las 2/3 partes de volumenformado con alcohol de 96° el alcohol debe de estar frio. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita elADN.
10. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado dela agrupación de muchas fibras de ADN.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué dificultades se presentaron para la realización de la práctica?
2. ¿Por qué se le agrega zumo de papaya o piña?
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