Extraccion De Adn

UNIVERSIDAD CATÓLICA DE VALENCIA SAN VICENTE MARTIR
Bioquímica
Profesor: Dolores Planes

PRÁCTICA LABORATORIO
Extracción de ADN

Josep Arocas Ortiz
9 de diciembre de 2012INTRODUCCIÓN:
En esta práctica vamos a utilizar un sencillo proceso para intentar extraer el ADN de un tejido animal, en este caso de un hígado de pollo, para familiarizarnos con ellaboratorio, su funcionamiento y sus utilidades.

MATERIALES:
- Higado de pollo
- Varilla de vidrio
- Mortero
- Vasos de precipitado
- Pipeta
-Trocito detela para filtrar
- Probeta
- Arena
- SDS
- Cloruro sódico 2Molar
-Alcohol de 96
-Guantes
-Agua

RESUMEN DEL PROCESO:
1. Triturar medio hígado de pollo en un mortero. Añadirarena para que al triturar se puedan romper las membranas celulares y queden los núcleos sueltos.
2. Añadir al triturado, 50 cm cúbicos de agua. Remover hasta hacer una especie depapilla o puré.
3. Filtrar 2 veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper.
4. Medir el volumen del filtrado con una probeta.
5. Añadir alfiltrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos producir la liberación de las fibras de cromatina.
6. A continuación se añade 1 cm cúbico de SDS. La acción de estedetergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así no quedará el ADN libre de las proteínas que tiene asociadas.
7. Añadir mediante una pipeta 50 cm cúbicos dealcohol de 96:. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN.
8. Introducir una varilla de vidrio eir moviendo en la misma dirección. Sobre la varilla se va adhiriendo unas fibras blanca, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de muchas fibras de ADN.