Extraccion de DNA

1.- ¿Cuál es la función de la sucrosa en la extracción de DNA?
La sucrosa ocasiona un shock osmótico a las células de la sangre (leucocitos), absorbiendo la glucosa de las células yentonces es reducida y rota, liberando así el núcleo para la extracción de DNA. Desnaturaliza la membrana por shock osmótico
2.-Caracteristicas fisicoquímicas del DNA:
Densidad deDNA: Existe una relación lineal entre la densidad de DNA y el número de uniones C=G que contenga, se ha obtenido una fórmula de manera empírica para saber su densidad de acuerdo al númerode uniones cisteína guanina= DENDISAD= 1,660+0.00098(C+G)
Temperatura de fusión= La Tm también dependerá del número de enlaces C+G en la molécula de ADN, ya que entre tendrá mayornúmero de enlaces, provocando que se necesite mayor cantidad de energía para romperlo o desnaturalizarlo.
Absorbancia: Depende del estado físico del DNA: el menor gado de absorbancia es enestado de doble hélice (260nm), la absorbancia aumentara conforme el DNA se continúe desnaturalizando.
3.- Fundamentos de la extracción por afinidad de solvente
Aquellos compuestosque tienen estructuras semejantes, son afines entre si, por ejemplo; el metanol y el etanol tienen un grupo hidroxilo que les confiere cierta electronegatividad y serán capaces deinteractuar entre sí, cuando se junta una parte de pentano con agua se formaran dos fases y si agregamos metanol, el metanol de disolverá en el agua separándolo completamente del pentano,esta técnica permite la separación de compuestos orgánicos de una manera muy eficiente:
Se deben de tomar en cuenta:
El coeficiente de reparto: Que es la capacidad de un compuesto dedisolverse en una sustancia
El Volumen de extracción: La extracción de dos volúmenes pequeños de un disolvente será más efectivo que realizar la extracción con un solo volumen mayor.