extraccion de DNA

Practica 1
Extracción de DNA
MATERIAL
1.- Muestra vegetal: Puede tratarse de cebolla, tomate, plátano, germen de trigo o un puñado de guisantes.
2.- Agua destilada o mineral
3.- Sal de mesa2gr
4.- Detergente lavavajillas 20 ml
5.- Alcohol de 96 º muy frío 30 ml
6.- Varilla de vidrio
7.-. Tubo de ensayo
8.- Batidora y un cuchillo.
9.- Vaso de precipitado
10.-Probeta o pipetaPROCEDIMIENTO
1.- En el vaso de precipitado pequeño echa 3 cucharaditas de detergente lavavajillas.
2.- Añade una cucharada de sal.
3.- Añade 25 mililitros de agua destilada
4.- Mantener en un bañode hielo esta disolución.
5.- Corta la zona central del vegetal elegido en cuadrados.
6.- Tritura los trozos del vegetal (en el vaso de precipitado grande) con un poco de agua
en la batidora (lamezcla de células y agua debe ser opaca), accionando 2 veces las
cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células.
7.- Mezcla en el recipiente grande el triturado celular con ladisolución inicial
del vaso.
8.- Agita vigorosamente la mezcla durante al menos 5 minutos, sin formar
espuma.
9.- Haz pasar el líquido obtenido por un colador.
10.- Retira 5 ml. de la mezcla a untubo de ensayo y añade con la pipeta 5
mililitros de alcohol enfriado a 0º C. Se debe dejar escurrir lentamente el
alcohol por la cara interna del tubo de ensayo, teniendo éste inclinado. El
alcoholquedará flotando sobre la mezcla.
11.- Deja reposar durante 5 minutos hasta que se forme una zona turbia entre
las 2 capas. (Mientras esperas este tiempo, puedes ir recogiendo y limpiando
todos losrecipientes empleados anteriormente).
12.- Introduce una varilla justo debajo del alcohol (la zona turbia que queda
entre las 2 capas). Remueve la varilla hacia delante y hacia atrás y poco apoco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN.
13.- Pasado un minuto, retira la varilla atravesando la capa de alcohol, con lo
cual el ADN quedará adherido a su extremo, con el...