extraccion de proteinas





PRÁCTICA 2 Y 3
EXTRACCION Y SEPARACION DE PROTEINAS Y LIPIDOS
CUANTIFICACIÓN DE LÍPIDOS Y PROTEÍNAS

MATERIA:
Estructura y función celular

PROFESORA:
Monserrat pacheco

INTEGRANTES:
Flores Vicente Omar
Luna Sandoval Gerardo
Morales Hernández Itzel
Rosas Ruiz Arabeli
Santín Márquez Roberto




INTRODUCCION
Lasproteínas y los lípidos son fundamentales para la estructura y función de las células.
Los lípidos son compuestos orgánicos químicamente heterogéneos entre si. Se puede definir como lípido a aquellos compuestos que son insolubles en agua, pero solubles en solventes orgánicos como el etanol, éter, acetona etc. Los componentes principales de las membranas son los fosfolípidos.
Las proteínas sonmacromoléculas formadas por monómeros conocidos como aminoácidos. Las proteínas son las biomoléculas más abundantes en los seres vivos y las que se presentan gran diversidad de funciones.
La extracción de la proteína albúmina, se extraen y separan dos grupos de lípidos muy importantes, ambos conocidos como fosfolípidos, por contener fosforo: lecitinas y cefalinas.
Una yema con un peso aproximadode 10 g contiene un 50% de agua, 17% de proteínas y 33% de lípidos; entre los cuales los fosfolípidos representan un tercio de la masa lipídica y se componen esencialmente de lecitinas (70%) y cefalinas (25%).
Composición de la yema
La yema es la porción amarilla del huevo, está recubierta por la membrana vitelina que la separa de la clara y la protege de una posible rotura. El color estádeterminado principalmente por la dieta de la gallina. Puede presentar una mancha rojiza, que corresponde al disco germinativo, a partir de la cual se desarrollaría el pollo en caso de que el huevo hubiera sido fecundado. Es una dispersión de diferentes tipos de partículas suspendidas en una solución proteica. La cantidad de proteína sobre sustancia seca es de 31,1% y la de grasa del 65,8%, con grancantidad de lipoproteínas de baja densidad (LDL) ricas en colesterol. La fase continua (78%) está formada por un extracto seco de proteínas globulares y LDL, mientras que la fase dispersa (20%) lo está con proteínas globulares y lipoproteínas de baja densidad (HDL). La principal proteína de la yema es la vitelina.
Composición de la clara
La albúmina es una solución viscosa (coloidal), que rodeaa la yema y se encuentra contenida entre las membranas del cascarón.
Constituyentes
Sus constituyentes son 88% agua, 11% proteínas, 1% carbohidratos y 0.5% minerales. Básicamente se trata de una solución de proteínas globulares que contienen fibras de ovomucina (existen más de treinta proteínas diferentes). Son ricas en aminoácidos esenciales. Esta tres glucoproteínas suman más del 80% deltotal de proteínas en la clara de huevo. La principal proteína de la clara del huevo, más de la mitad del total, es la ovoalbúmina.
Existen diferentes métodos para la cuantificación de proteínas, los cuales se basan en:
a) Propiedad intrínseca de las proteínas para absorber luz en el UV.
b) Formación de derivados químicos.
c) Capacidad que tienen las proteínas de unir ciertos colorantes.No hay método completamente satisfactorio para medir la concentración de proteínas en una muestra La elección del método depende de la naturaleza de la proteína, de los otros componentes, de la rapidez y sensibilidad deseada.
El método para la determinación cuantitativa de los fosfolípidos obtenidos de la yema de huevo, se basa en la determinación cuantitativa del fósforo presente en elfosfolípidos mediante el método modificado por Bartlett (1959). Este método se basa en la reacción del fósforo inorgánico con el molibdato de amonio en disolución ácida para formar ácido fosfomolíbdico. Posteriormente al adicionar un agente reductor, este reduce al molibdeno produciendo una coloración azul que puede medirse en un espectrofotómetro.


Método de Bradford
Se basa en la unión de un...