Extraccion Del Adn

EXTRACCIÓN DEL ADN ANIMAL
OBJETIVOS
* Extraer ADN en muestras de tejidos animales.
MARCO TEORICO
Para la extracción del ADN del núcleo de las células, es necesario homogenizar las levaduras enhidróxido de sodio (NaOH) y sodio duodecil sulfato (SDS). Este tratamiento favorece la ruptura de la pared y de la membrana celular, además de contribuir a la desnaturalización de las proteínas.
Conel fin de liberar el ADN de las proteínas, se utilizan una serie de agentes desnaturalizantes, como el perclorato de sodio y la mezcla de cloroformo y alcohol isoamilo. Después de agregar los agentesdesnaturalizantes, se centrifuga la solución y se obtienen dos fases: una orgánica y una acuosa, separadas por una interfase de proteínas desnaturalizadas; en la fase acuosa se encuentra el ADN. Lamezcla de cloroformo y alcohol no solo desnaturaliza las proteínas, sino que disuelve los lípidos de la muestra y aumenta la separación de las fases.
El ADN de la fase acuosa se recupera porprecipitación. La precipitación en etanol absoluto en presencia de una sal es un método muy utilizado en los procesos de extracción de ADN. Luego, el ADN se disuelve en solución salina, y puede ser almacenadopara utilizarlo en experimentos posteriores.
MATERIALES
* Hígado de pollo 200 gr.
* Varilla de vidrio.
* SDS El dodecilsulfato sódico ( cualquier detergente concentrado)
* Arena.* Pedazos de tela para usar como filtro.
* Vasos precipitados de 200 ml o 500 ml.
* Probeta.
* Embudo.
* Mortero y pilón.
REACTIVOS
* Alcohol de 96°
* Cloruro sódico 2M* Azul de metileno o eosina.
PROCEDIMIENTO

* Triturar medio hígado de pollo en un mortero. Añadir arena para que al triturar se puedan romper las membranas y queden los núcleos sueltos.* Añadir al triturado, 50 centímetros cúbicos de agua destilada. Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.
* Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de...