Extraccion Y Purificacion De Adn

MARCADORES MOLECULARES Y LA EXTRACCIÓN DE ADN MOLECULAR MARKERS AND THE DNA EXTRACTION
REINALDO VELASCO MOSQUERA1

PALABRAS CLAVE:
Marcadores moleculares, extracción de ADN, biología molecular, diversidad genética.

RESUMEN
En el presente artículo se hace una breve descripción de los marcadores moleculares y de las categorías y técnicas basadas en hibridación y en la reacción en cadena dela polimerasa PCR. A continuación se hace una esplicación detallada del método de extracción de ADN empleado en el laboratorio de Biología Molecular de la Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira, para los estudios de diversidad genética, enfatizando en las reacciones que ocurren a lo largo del proceso de extracción.

KEY WORDS:
Molecular markers, ADN extraction, PCR, molecular biology,genetic diversity.

ABSTRACT
In the present article a brief description of molecular markers, the categories and techniques based on hybridizing and the chain reaction of polymerase PCR is done. Next it is explained thorough of the ADN extraction method for the genetic diversity studies employed in the molecular biological laboratory of the National University, headquarters Palmira,emphasizing in the reactions that occurs throughout the extraction process.

INTRODUCCIÓN
Los marcadores moleculares o marcadores ADN revelan sitios de variación naturales a nivel de secuencia de ADN. A diferencia de los
____________ Recibido para evaluación: Diciembre 10 de 2004. Aprobado para publicación: Febrero 10 de 2005. 1 M. Sc. Especialista en Biotecnología, Grupo de Investigación ASUBAGROINFCA Unicauca.

marcadores controlados por genes asociados a caracteres morfológicos (fenotipos de fácil identificación visual), las variaciones en los marcadores de ADN no se muestran por sí mismas en el fenotipo,

Correspondencia: biotecnologia@unicauca.edu.co

Facultad de Ciencias Agropecuarias Vol 3 No.1 Marzo 2005

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porque pueden ser diferencias en un solo nucleótido del gen o enun pedazo de ADN repetitivo. Los marcadores moleculares relacionados a una característica específica son de par ticular interés porque permiten identificar individuos que contengan esa característica y diferenciarlos de los que no la posean, es decir que dan información sobre la diversidad genética. Esto es un aspecto esencial en el campo de la biología tanto aplicada como fundamental: Ecología,Biología de la Evolución, Taxonomía, Agronomía, Biotec-nología, Microbiología, Genética, etc (1). Un gran número de técnicas moleculares puede ser utilizado para obtener marcadores de diversidad mediante la detección de polimor-fismo a nivel de ADN (2). La mayoría de los marcadores moleculares se clasifican en dos categorías de técnicas que se basan en la hibridación o en la Reacción en Cadenade la Polimerasa. PCR: Marcadores detectados por hibridación. Dentro de estos se agrupan las técnicas que emplean sondas para la detección de los marcadores. Las sondas son fragmentos de ADN o ARN que contienen el código complementario para una secuencia específica del genoma. Las técnicas más usuales son: Polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP), Número variable derepeticiones en tandem (VNTR) y ADNShips (Oligonucleotide arrays) (1). Marcadores basados en la PCR. Los marcadores identificados por amplificación del ADN están basados en la reacción en cadena de la polimerasa. La introducción de esta tecnología permitió nuevas posibilidades para la detección del polimorfismo genético (3). El polimosrfismo se observa debido a que la variación en la secuencia delgenoma altera los sitios de reconocimiento del “primer”. Permite la generación de grandes números de marcadores, su utilización n o es técnicamente difícil y solo utiliza mínimas cantidades de material genético. Las técnicas basadas en la PCR difieren entre sí en la longitud y secuencia de los primers empleados, condiciones de la PCR y en el método de separación y detección de los fragmentos. Los...