Extraccion

Luego hicimos el mismo procedimiento con la diferencia de que antes de agregar el peróxido y la bencidina calentamos las soluciones en baño maría por 3 minutos, en la sangre hubo de nuevo tinción,pero esta vez con menos intensidad porque hubo desnaturalización de las peroxidasas presentes en la sangre, pero aun así la poca tinción que se presento pudo ser por la presencia de agentes químicos enla sangre que no fueron afectados por el calor, así como la hemoglobina presente en la sangre tiene actividad pseudoperoxidasa donde es termoestable, resistiendo temperaturas tan elevadas como 180 ocdurante 20 minutos1 por eso aunque la sangre haya sido expuesta al calor o estado muy diluida, su hemoglobina tiene esta propiedad pseudoperoxidasa que permite que tenga un color azul en presencia debencidina.
En el caso de la identificación de la actividad enzimática en aguas termales no sería muy eficaz pues, debido a las altas temperaturas de estas aguas, las enzimas se desnaturalizan porquese rompen los puentes de hidrógeno que las mantiene unidas y pierden su plegamiento. Si llega a emitir algún color podemos asegurar que no es una actividad enzimática sino un producto químicopresente en estas aguas. En la figura 3 se muestra una comparación entre la muestra nativa de sangre y la muestra desnaturalizada después de agregar la bencidina, mostrando la intensidad de color en lamuestra nativa.








Por otro lado para realizar un experimento para determinar los valores de KM y de Vmax de la peroxidasa de zanahoria podemos adquirir esos valores primero colocando laenzima en un tubo de precipitados con Bencidina y añadiría poco a poco peróxido de hidrógeno. Debido a la presencia de la enzima, expulsara oxígeno al interactuar con este sustrato, este oxigeno oxidarala bencidina y provocara una coloración azul. A medida que vamos agregando debemos medir exactamente que tanto sustrato se está añadiendo a la mezcla. Se esperaría que el color fuera aumentando y...