extracción ADN

Introducción




Así como en cualquier organización la célula presenta un lugar de control que coordina las diversas actividades que se realizan en su interior. En la célula eucarionte este lugar de control es el núcleo el cual está separado del resto de la célula por una doble membrana; en el interior del núcleo se encuentra la cromatina que es una masa densa de material, esta “masa”durante la división se condensa formando cromosomas.

Estos “cromosomas” constan de proteínas y de una molécula muy importante que controla la actividad que tiene la célula y contiene el material hereditario, el “ADN”.

El ADN (ácido desoxirribonucleico) es un polímero formado por nucleótidos cada nucleótido consta de un azúcar de cinco carbonos (desoxirribosa) y una base nitrogenada. Al unirse losnucleótidos mediantes enlaces puentes de hidrógeno forman los ácidos nucleicos.

Este Polímero se encuentra presente en todos los seres vivos, y su funcionalidad en el ser vivo es de vital importancia ya que de él dependen todas las funciones de nuestro organismo, tiene la función de codificar todo lo que somos.

El ADN no tiene la capacidad de salir a través de la doble membrana que lo cubrees por ello que para algunas de sus funciones este debe de transcribirse de una doble cadena a una cadena ARN (ácido ribonucleico), una vez transcrito tiene la capacidad de salir libremente de esta doble membrana (carioteca) y con ello llevar a cabo sus funciones entre las cuales destaca la síntesis de proteínas.

En este laboratorio se demostró la tesis de: “si es posible extraer el ADN desdelas membranas internas de la célula sin realizar el proceso de transcripción” para ello se extrajeron hilachas filamentosas de ADN de una arveja (pisum sativum) demostrando lo ya mencionado.

Objetivos



Generales:

Extraer y analizar el ADN de embriones de arvejas.

Conocer e identificar las partes que componen la arveja (Pisum sativum).

Reconocer y comprender la importancia de lasmembranas que protegen las células eucariontes.

Observar la estructura fibrilar del ADN.

Específicos:

Identificar las sustancias que poseen la capacidad de destruir y/o dañar las membranas de una célula eucarionte.

Analizar los procesos necesarios para la extracción del ADN de una arveja logrando así determinar la importancia de cada proceso.

Mejorar la visión de conocimientosrelacionados con el ADN.




Metodología

Materiales:

1. Arvejas congeladas
2. Mortero
3. Ablandador de carne
4. Detergente liquido
5. Alcohol
6. Sal
7. Tubo de ensayo
8. Pipeta
9. Agua destilada
10. Aguja
11. Toalla nova

Procedimiento

❖ Se ubicaron los materiales en la zona de trabajo.
❖ Se extrajeron embriones de 100 arvejas aproximadamente (ver fig.1).
❖ Se juntaron todoslos embriones en el mortero y se molieron, simultáneamente se aplicó 2 ml de H2O formando una pasta. (ver fig. 2).
❖ Luego se aplicó 1gota de detergente líquido (Quix) y se esparció una pizca de sal. Se dejó reposar por 5 minutos.
❖ Se revolvió lentamente la mezcla y se introdujo en un tubo de ensayo inclinado. (ver fig.3).
❖ Se aplicó una pizca de ablandador de carne. (ver fig.4).
❖ Luego seaplicó 1 ml de alcohol con la pipeta lentamente.(ver fig.5)
❖ Más tarde se dejó reposar unos 5 minutos para observar las cadenas de ADN en el tubo de ensayo.
❖ Finalmente se tomó el ADN extraído, se ubicó en el microscopio y se observó la estructura fibrilar.(ver fig.6)




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(fig.1)


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(fig.2)


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(fig.3)
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(fig.4)

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(fig.5)


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(fig.6)Resultados


Luego de realizar el procedimiento ya mencionado se observan los siguientes cambios:


- Los embriones de arveja molidos y con H2O lentamente va formando la pasta esperada.
- Al agregarle H2O a los embriones su forma cambia, queda acuosa.
- Luego de agregar la pisca sal y la gota de Quix la mescla se hizo un poco mas densa.
- Al agregar la mezcla al tubo de ensayo,...