Extracción de ADN

EXTRACCIÓN DEL ADN

Índice
1.¿Qué es el ADN?
2. Muestras que se utilizan
3. Fundamento de la prueba de extracción de
ADN
4. Técnicas de extracción de ADN
5. Utilidad

¿Qué es el ADN ?
Materialgenético de todos los organismos celulares y casi todos los
virus.
Material genético Nucleótidos Base nitrogenada, azúcar y un
grupo fosfato
Función:
La función principal del ADN consiste en transmitirlos genes, es
decir los caracteres biológicos de un individuo determinado.

Para que se envía?
La extracción se realiza para obtener un ADN libre de proteínas y enzimas


Muestras extracción del ADNSangre
Semen
Saliva
Cabello
Hueso
Diente
Tejido

Fundamento

El procedimiento básico de
la extracción de ADN se
divide en 5 pasos los cuales
se pueden realizar
simultáneamente
dependiendo delprotocolo
a usar

Lisis de las células o virus.

Romper la estructura
tridimensional de
macromoléculas como las
proteínas o los ácidos nucleicos
consiguiendo su
desnaturalización

Métodos de lisiscelular

DETERGENTES. Los
detergentes de amoniaco
se utilizan para extraer el
ADN de parásitos
células en cultivo y
tejido

ENZIMAS
Se usan para extracción
de ADN bacteriano
total o plasmídico

AGENTESDESNATURANTES
Se utiliza para extraer
ADN de diferentes tipos
celulares y tejidos

Digestión
enzimatic
a
Degradación
de la fracción
asociada al
ADN

Se consigue mediante
la adición de una
proteasaEnzimas proteolíticas
Proteinasa K
Sal sódica de ácido
etildiaminotetraacético EDTA se
usa para inhibir la acción
DNAasa

Eliminación
de ARN

Digestión de
ARN con
RNAasas

Ribonucleasa
A de páncreasbovino

Eliminació
n de
proteínas

La desproteinizacion
se lleva a cabo con
solventes orgánicos
como el FENOL y el
CLOROFORMO

Se utilizan en una
relación 1:1 las
proteínas quedan
desnaturadas en lainterface y el ADN en
solución acuosa

Concentració
n del ADN

Precipitación con
ETANOL en
presencia de
cationes
monovalentes

Provocan
agregación y
precipitación del
ADN

• Se remueven
los residuos...