Extracción Y Separación De Clorofila A Y B
Clorofila
1. Resultados
El objetivo de la práctica de laboratorio fue la extracción y separación de la clorofila a y b de hojas de espinaca y posterior sustitución del ionmagnesio por cobre y zinc de forma directa e indirecta.
* Sustitución indirecta
Separación placa cromatografía
Clorofila a (verde) | Clorofila b (amarilla) |
λ (nm) | Absorbancia | λ(nm) | Absorbancia |
433 | 0,260 | 448 | 0,221 |
457 | 0,117 | | |
664 | 0,174 | | |
Tabla 1. Datos espectros de absorción clorofila a y b en acetona.
Al adicionar HCl, se observa unprecipitado blanco en una solución amarilla clara.
Clorofila a (verde) | Clorofila b (amarilla) |
λ (nm) | Absorbancia | λ (nm) | Absorbancia |
448 | 1,340 | 664 | 0,087 |
661 | 0,563 | 412 |0,235 |
Tabla 1. Datos espectros de absorción feofitina
Al adicionar Cu(NO3)2 se observa un circulo de color blanco que flota en una solución color azul.
* Sustitución directa
|Observaciones |
CH3COOH | Hojas marchitas, solución amarilla |
CH3COOH + Cu(NO3)2 | Hojas marchitas, solución azul agua marina |
CH3COOH + ZnCl2 | Hojas marchitas, solución color café |
Tabla 2.2. Análisis de resultados
La clorofila a es más apolar que la clorofila b, debido que la primera presenta un sustituyente carbonilo y la clorofila b un metil; esto también se evidencia en laplaca de cromatografía donde el eluyente mayoritario (éter de petróleo) es apolar y la clorofila a es la primera en ser arrastrada.
Figura 1.Estructura molecular clorofila a y b.
* Sustitución indirecta
Al realizar la extracción de la clorofila de hojas de espinaca con acetona, se obtiene una mezcla impura de clorofila a y b.posteriormente, se realiza una cromatografía preparativa para la separación de dichas clorofilas (imagen 1).
Imagen 1. Cromatografía preparativa.
Al comparar el...
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