Extracción Y Separación De Pigmentos Vegetales

Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b(verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) endiferentes proporciones.

Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separación cuando una solución de las mismas desciende por através de una columna de cromatografía verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico, ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolventea medida que éste desciende. Las menos solubles avanzarán menos en la columna.

Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo del materialutilizado)que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseerán diferente grosor, dependiendo de la abundancia delpigmento en la disolución.

En la práctica se extrajeron estas clorofilas al primero hervir en agua las espinacas para retirar el almidón, después se extrajeron con una mezcla de metanol y éter dietílico las clorofilas y por medio de una extracción líquido-líquido con éter de petróleo clorofilas y carotenos con ayuda de una solución sobresaturada de NaCl para evitar emulsiones y obtenerlas 2 fases. Una vez extraídos los pigmentos fotosintéticos, se procedió a realizar una cromatografía de adsorción para separar las distintas clorofilas que componen dichos pigmentosfotosintéticos que componen las coloraciones de las hojas de las plantas observándose que estas se iban corriendo por la columna dependiendo de la afinidad que tuvieran por el disolvente y se obtenían endiferentes cantidades de acuerdo al tipo de clorofila, ya que por ejemplo se obtuvo en mayor cantidad la clorofila alfa debido a que esta es la que compone casi el 75% de las clorofilas de la planta.