Farma Practica 2
Facultad de Química.
Laboratorio de Farmacología I.
Reporte de práctica:
Determinación de la ventana de actividad biológica y la dosis efectiva 50 en un sistema simulado.
PRÁCTICA NO. 2: DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN LETAL 50 (CL50) DEL DICROMATO DE POTASIO EN ARTEMIA SALINA.
➢ Introducción.
La CL50 es la concentraciónnecesaria para una mortalidad del 50 % de una población bajo estudio, y se puede calcular mediante las curvas cuantales o una curva dosis-respuesta gradual (Rang, Dale; 2008), o mediante métodos de ajuste lineal como las unidades Probit.
Un bioensayo, es un proceso experimental mediante el cual se determinan las características y la fuerza de una sustancia potencialmente tóxica, a través delestudio de sus efectos sobre organismos cuidadosamente escogidos y bajo condiciones específicas de laboratorio.
La Artemia Salina es un género de crustáceos branquiopodos del orden anostráceos, de pequeño tamaño llegando a alcanzar 10-15 mm en etapa adulta, y desprovistos de caparazón. Viven en las aguas salobres del litoral o del interior. Presentan razas anfigónicas y partenogenéticas,adaptadas a cada medio en particular. En las razas partenogenéticas son frecuentes las formas polipoides.
El Cr(VI) existe en formas aniónicas CrO42-, HCrO7- o Cr2O7-, dependiendo del pH del medio, tiene la capacidad de ingresar a la célula utilizando la vía general de los canales proteicos transportadores de aniones.
Al ingresar al espacio intracelular, el cromo (VI) interacciona conagentes reductantes e inicia un proceso reductivo a los estados Cr(V), Cr(IV) y Cr(III), generando una fuerza oxidativa capaz de producir lesiones en el DNA, aductos Cr-DNA, uniones cruzadas DNA-DNA, DNA-proteínas, sitios apúricos, entre otros.
Los mecanismos de transporte del cromo a nivel celular, la interacción con agentes reductantes como el glutatión y uniones con el DNA, no seencuentran totalmente esclarecidos. Ensayos ecotoxicológicos en Artemia salina muestran la toxicidad aguda del K2Cr2O7. [1]
En ésta práctica realizaremos pruebas utilizando como sistema biológico artemias salinas, las cuales estarán inmersas en disoluciones de dicromato de potasio a diferentes concentraciones.
Observaremos la respuesta biológica de las poblaciones de atermias salinas antediferentes concentraciones de la disolución de dicromato de potasio de manera cuantal (respuesta de tipo todo o nada), y con los resultados obtenidos del bioensayos realizaremos una curva dosis-respuesta cuantal, la cual nos permitirá estimar la concentración letal 50 del dicromato de potasio en las artemias salinas.
DICROMATO DE POTASIO
El dicromato de potasio (K2Cr2O7) es una sal delhipotético ácido dicrómico (este ácido en sustancia no es estable) H2Cr2O7. Se trata de una sustancia de color intenso anaranjado. Es un oxidante fuerte.
Toxicidad. El dicromato de potasio es tóxico. En contacto con la piel se produce sensibilización y se pueden provocar alergias. Al igual que los cromatos, los dicromatos son cancerígenos. En el cuerpo son confundidos por los canales iónicoscon el sulfato y pueden llegar así hasta el núcleo de la célula. Allí son reducidos por la materia orgánica presente y el cromo(III) formado ataca a la molécula de la ADN.
MECANISMO DE REACCION DEL DICROMATO DE POTASIO
➢ Hipótesis
Por medio de la construcción de la curva dosis-respuesta cuantal, se espera determinar la CL50 en un bioensayo a través del método probit, ocupando laartemia salina como sujeto de prueba y se espera que a mayor concentración de Dicromato de Potasio existan más muertes de artemia salina
➢ Objetivos.
1. Manejar un sistema biológico alterno a los mamíferos y roedores para la determinación de una curva concentración-respuesta cuantal.
2. Realizar el cálculo de la CL50 mediante el análisis probit.
➢ Metodología...
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